九、实验结果的评价及分析


1、对于三隐性的突变体生活能力相对较弱，杂交 时，要格外的小心培养，另外可以适当的更加亲 本个体数量。 2对于这次实验，自认为是否得到满意的结果，若 是；则对于实验本身还有没有更好的改进地方， 若无；则参照标准的实验结果，对自身的小组实 验做一份分析报告。
十、思考题：
果蝇综合大试验
正交组
一、实验目的：



1、掌握果蝇遗传杂交的基本原理和杂交技 术； 2、真正认识、理解并验证遗传规律（分离 规律、独立分配规律、伴性遗传规律）； 3、学习实验数据的收集和统计处理方法。
二、实验内容:


1、果蝇分离定律的实验分析 2、果蝇自由组合的实验分析 3、果蝇的伴性遗传实验分析 4、果蝇的三点测验实验分析
五、试验步骤与技术 路线
收集亲本蝇 ↓ 在每个培养瓶中放5-6对亲本蝇 ↓ 25℃培养5-6天
必须选处女蝇
F1幼虫出现，倒亲本 ↓ 25℃培养3-4天
注意：亲本要倒干净！
检查F1成蝇性状，统计表型及雌雄个数 ↓ 从每瓶中选5-6对成蝇，分别再转 移到新培养瓶中培养。 ↓ 25℃培养3-4天 F2成蝇出现，每隔两天统计一次 ↓ •根据记录数据计算各种性状的分 离比，做χ2检验。 此处不需要处女蝇
查x2表
F2
观察日期（ 观察日期（ 观察日期（ 观察日期（ 观察日期（ 观察日期（ 观察日期（ ） ） ） ） ） ） ）
雄性红眼
雄性白眼
雌性红眼
雌性白眼
加和每天的实验观察 数(O) 理论数(C)
偏差(O-C)
(O-C)2/C
自由度=4-1=3
X2=∑[(O-C)2/C]=
查x2表
三点测交试验中观察的记录
雌 雄
1 1
： 3 ： 3
1 1
： 3 ： 3

伴性遗传: 位于性染色体上的基因,其遗传方式与 位于常染色体上的基因不同,它的传递方式 与雌雄性别有关.因此称为伴性遗传.果蝇的 性染色体有x和y两种,雌蝇为xx,是同配性别; 雄蝇为xy,是异配性别.

伴性遗传： P: ♀白 × ♂红 XwXw X+Y F1 ♀红 × ♂白 X+X XwY

八、实验中可能存在的困难、问题及 解决方法
1、亲本雌蝇为何一定要选用处女蝇？怎样才能保证所选 雌蝇为处女蝇？ 2、在进行亲本杂交或F1自交一定时间后为什么要释放杂 交亲本或F1？ 3、反交组为何不能直接进行三点测验？如果需要进行反 交组的三点测验，应如何对实验过程加以调整？ 4、伴性遗传的性状在正交和反交的后代中为什么会出现 差异？与性别的关系如何？ 5、本实验中为何正交组与反交组自由组合定律的预期分 离比不同？
3、伴性遗传的特点就是交叉遗传，母本将形 状遗传给子代雄性，父本将形状遗传给子 代雌性。 正交F1代♀♂都是野生型[+]，F1互相交配 得F2代，则♀都是野生型[+]，♂则野生型 [+]与白眼型[w]比为1：1。 反交♀为野生型[+]♂为白眼[w]，F1交配得 F2代，♀的红眼与白眼的比例为1:1, ♂的红 眼与白眼比为1：1
1、利用实验室保存的哪两个果蝇品系杂交， 即可一次验证所有的遗传定律？ 2、在进行杂交和F1自交后一定时间为什么要 释放杂交亲本？ 3、在伴性遗传的性状在正反？交中为什么会 出现差异？与性别关系如何？
1、实验所用果蝇灰体与黑檀体在2号染色体 上，另外三个性状眼色，翅长，刚毛都在1 号性染色体上。这样既可以验证两条染色 体上的基因分离与自由组合定律，也可以 验证性染色体上的伴性遗传，及三点测验。
三点测验: P: ♀白短卷 × 红长直 w m sn + + + F1:♀ 红长直 × ♂白短卷
+ + + w m sn
F2: 红长直 白短卷
亲本型
w m sn
红短卷 白长直 红短直
白长卷 红长卷 白短直
重组型
四、实验器具和药品
1:用具:麻醉瓶、白瓷板、体式显微镜、毛笔、 镊子、培养瓶、不干胶标签 2.药品:无水乙醚、玉米粉、琼脂、蔗糖或白 糖、酵母粉、丙酸、乙醇


实验中涉及的两条染色体中一条是性染色 体，因此F1雄蝇性状中处在性染色体上那 一对基因的应符合伴性遗传的规律。正反 交结果是不同的。所以整个自由组合的两 对基因所得结果也不符合9：3：3：1。 反交为3:3:1:1

参考文献： 乔守怡，遗传分析试验教程，2008.1 北京： 高等教育出版社.
重复同样杂交2-3瓶。在各个培养瓶壁上做好交 配类型、日期和培养瓶序号标记。
4、2天后将杂交瓶里的所有亲本果蝇麻醉后弃除。 25度条件下，约1周至10天后开始有成蝇出现。 5、对分离定律组：子一代（F1）观察与计数，各 瓶分别统计。将陆续羽化出来的F1成蝇隔天收集 一次，深度麻醉后仔细观察，按照表型和雌雄分 别计数。为了防止误将F2计入，F1羽化开始8天 后停止收集和计数。 对后面三组：子一代（F1）自交，从亲本杂交 瓶中选取新羽化的子一代雌雄成蝇各2-5只放入 同一个培养瓶中。每种杂交重复2-3瓶。2天后将 F1杂交瓶里的所有果蝇弃除（操作同亲本杂 交 ）。25度条件下，约1周至10天后开始有子二 代成蝇出现。
三、实验原理

果蝇的性状主要从以下四个方面进行观察： 每个方面都有不同的性状：
灰体 红眼
体色
黑体 b (2) 黑檀体 e (3) 黄体 y (1) 长翅
眼色
白眼 棒眼 直刚毛
w (1) B (1)
翅型
短翅 m (1) 卷翅 Cy (2) 残翅 vg 2)
刚毛
卷刚毛 sn (1)
后面的字母代表染色体所在的位置，由此我们知道，在研究与性别有关 的遗传定律时，应选择那些基因
6、子二代（F2）观察与计数，各瓶分别统计。将 陆续羽化出来的F2成蝇隔天收集一次，深度麻醉 后仔细观察，按照表型和雌雄分别计数。为了防 止误将F3计入，F2羽化开始8天后停止收集和计 数。 7、利用X2 测验分析试验结果。
(观察值-理论值)2 x2 =∑ ———————— 理论值
根据x2表，若p＞5%，说明观察值与理论值之 间的偏差是没有意义的，即可认为观察值是符 合假设的。
谢谢大家
^-^
避免亲代与子代间发生交配； 释放亲代后才能对子代的形状进行统计， 否则亲代掺杂在自代中影响子代性状统计


因为正交组的亲本雄蝇1号染色体的性状全 为隐性性状。杂交后产生的F1代中雄性为 显性性状，且雄果蝇完全连锁，因此无法 进行三点测验。 若想进行三点测验，应将F1雌蝇与隐性纯 合体的雄果蝇杂交。
根据前一次的实验得到以下各品系 的表型特征：
品系 3 4 体色 黄 灰 眼色 红 红 翅型 长 残 刚毛 直 直
6
18 22 26
灰
灰 灰 黑檀e(3)
白w(1)
红 白 红
短m(1)
长 长 长
卷sn(1)
直 直 直
故选择6号，26号品系作为实验的材料
分离定律:一对基因在杂合状态中保持相对的 独立性,而在配子形成时,又按原样分离到不 同的配子中去,理论上配子分离比是1:1,子二 代基因型分离比是1:2:1,若完全显性,子二代 表型分离比是3:1.

1、亲本收集
分离定律： 将灰果蝇和黑 檀体果蝇分别 培养，使其产 卵。
自由组合定律： 将灰体白眼果 蝇和黑檀体红 眼果蝇分别培 养，使其产卵。
半性遗传： 将白眼果蝇和 野生型（红眼） 果蝇分别培养， 使其产卵。
三点测验： 将白眼短翅卷刚 毛和红眼长翅直 刚毛果蝇分别培 养，使其产卵。
9-10天后，开始收集新羽化的各组处女蝇，同 时收集野生型雄蝇，分别放在另外的培养瓶 中，25度培养待用。
1 : 1ຫໍສະໝຸດ F2 ♀红 ♀白 ♂红 ♂白
1 : 1 : 1 : 1
三点测验: 三点测验是通过一次杂交和一次用隐性 亲本测交,同时确定3个基因之间的遗传距离 和排列顺序的方法.三位座杂合亲本可以产 生8种配子,因此在测交子代中存在8种不同 基因型的个体,经过数据处理,一次实验就可 以测出三个连锁基因的距离和顺序.
测交后代表型 观察数 m—sn sn w m + + + + w + sn + m sn + + + w m + + m sn w + 总计 重组值 + + + + 重组发生在 m—w + + + + w—sn + + + + -
七、注意事项

1、混杂：几个不同品系的果蝇在一起培养，
一定要防止混杂。培养瓶的塞子要做得紧些，不 使果蝇逃出。调换培养瓶时，要防止果蝇飞散。 外逃的果蝇要打死。发现了混杂的原种，要根据 原种果蝇的全部特征，挑出数对雌雄蝇饲养，进 行筛选直到完全没有分离为止。这样做，费时费 力，只是在不得已时才采用。一般混杂时，只要 方便，可以重新引种，将混杂种弃去 2、建议在可行性的范围内，尽可能多的手机F2的 个体，可以分别对F1杂交做二次和三次，以保证 足够的数量分析材料
查x2表
自由组合定律组数据记录及x2检测
灰体红眼 观察日期（ 观察日期（ 观察日期（ 观察日期（ 观察日期（ 观察日期（ 观察日期（ ） ） ） ） ） ） ） 灰体白眼 黑体红眼 黑体白眼
加和实验观察数(O) 理论数(3:3:1:1)(C) 偏差(O-C) (O-C)2/C
自由度=4-1=3
X2=∑[(O-C)2/C]=
2、2天后，确认放处女蝇的培养瓶中没有幼虫出现 （如有，说明收集处女蝇失败）。 3、亲本杂交
分离定律： 将3-5只黑檀体处 女蝇和5-8只野生 型雄蝇放入同一 个培养瓶中。 自由组合定律： 将3-5只灰红处 女蝇和5-8只灰 白雄蝇放入同 一个培养瓶中。 半性遗传： 将3-5只白眼处女 蝇和5-8只红眼雄 蝇放入同一个培 养瓶中。 三点测验： 将3-5只白眼短翅 卷刚毛处女蝇和58只红眼长翅直刚 毛果蝇放入同一 个培养瓶中。