审批部门姓名签名日期起草人品质管理部起草人生产技术部起草人针剂车间审核人针剂车间审核人生产技术部审核人质检中心审核人品质管理部批准人质量负责人分发部门：培养基模拟灌装（小容量注射剂）无菌生产工艺验证小组一、概述厂区无菌操作生产线，按2010 版 GMP及其附录要求进行设计，是专用于小容量注射剂非最终灭菌产品生产使用。

某某产品因无法进行F0≥8 分钟湿热灭菌，以达到SAL≤ 10-6，但处方可以通过微生物滞留过滤器过滤，故采用除菌过滤和无菌工艺相结合的灭菌方法。

无菌生产工艺是制药领域中最难的工艺之一，确保产品无菌是该工艺最大的难点，减少无菌工艺药品污染风险的两项重要措施为：①人员的培训②无菌工艺验证。

按 SFDA化学药品注射剂基本技术要求：培养基灌装验证是对设备、环境以及人员操作的一种系统验证，是判断无菌保证水平的关键手段。

故在正式生产前必须按某某产品生产工艺进行培养基模拟灌装验证。

1 本次验证关键生产工艺流程图安瓿的清洗称量配料工器具清洗和灭菌除菌过滤干热灭菌灌封灯检D级背景 C 级背景 A 级背景一般区2验证原理将培养基暴露于设备、容器密封系统的表面和关键环境条件中，并模拟实际生产完成工艺操作。

对装有培养基的密闭容器进行培养以检查微生物的生长并评价结果，确定实际生产中产品污染的可能性。

对于失败的验证进行菌种分析并调查，确认并解决可能造成失败的原因后，重新进行验证。

3验证次数按 2010 版 GMP附录 1 要求因该生产线为新建厂区设施，为培养基模拟灌装试验的首次验证，故需进行连续三个批次的验证活动。

二、验证目的1通过该工艺验证活动证明新设计厂房采用既定的无菌生产工艺能保证产品的无菌要求；2通过该工艺验证活动证明无菌操作相关人员资格，降低人员带入无菌的风险；3通过该工艺验证活动确保生产符合现行GMP法规要求。

三、验证范围和实施时间1 本验证方案适用于厂区小容量注射剂车间无菌生产线正式投入使用前某某品种小容量注射剂无菌生产工艺培养基模拟灌装验证活动；2 计划验证实施时间为2013 年 3 月 ~4 月连续三个批次。

四、验证小组和职责1 验证小组根据验证的内容和验证管理文件要求，成立验证小组，验证小组成员见下表，小组人员应在最终验证报告中签名确认。

在验证实施前，方案起草人应对所有相关参与人员进行验证方案的培训，做好培训记录，并将记录附于验证报告后。

姓名职务生产技术部经理技术管理员车间主任车间技术副主任配料岗位人员洗瓶岗位人员职责验证小组组长，负责验证文件的审核和工作总体安排和实施，组织调查和处理验证过程中出现的异常情况负责验证文件的起草，提供验证过程中相关技术支持，参与验证异常情况调查工作安排车间岗位人员配合验证工作的实施，对验证过程的异常情况进行协助调查，负责验证文件的审核负责验证文件的起草，提供验证过程中相关技术支持，参与验证异常情况调查工作负责配料操作和除菌过滤以及灭菌操作并记录负责洗瓶和安瓿灭菌操作并记录灌封岗位人员负责灌封操作并记录灯检岗位人员负责灯检操作和产品7 天和 14 天的观察与统计维修员负责验证过程中设备的维修工作，参与验证模拟维修活动QC负责验证相关检验工作和检验数据收集统计工作，参与验证过程异常情况调查工作，负责验证结束后培养基的灭活处理工作QC经理负责验证文件的审核，协调验证相关检验工作，参与验证异常情况调查处理QA负责验证文件的审核和文件的归档，协调各部门相关工作具体安排QA确保验证活动按方案执行，确保验证活动符合GMP要求，负责相关取样工作QA负责验证文件的起草，组织验证方案相关培训，参与验证异常情况调查工作质量负责人负责验证文件的批准，验证证书的签发2各部门职责品质管理部协助验证活动的执行参与验证异常情况的调查和处理参与验证文件的起草工作负责验证过程的取样负责生产监督，保证所有数据的真实性和完整性负责验证文件的审批和归档质检中心协助验证活动的执行，提供必要的取样工具参与验证异常情况的调查和处理负责相关检验工作，提供相关检验数据负责最终培养基的处理生产技术部负责验证活动的执行负责验证数据的收集和相关文件的起草负责组织验证过程中异常情况的调查和处理生产车间负责验证相关操作活动参与异常情况的调查和处理参与验证文件的起草和审核工程部协助验证活动确保其顺利完成维修人员参与验证活动的实施物料管理部协助提供验证活动过程中所需物料五、风险评估分析表通过风险评估，确认本次验证活动需要验证的项目可严可风险风险描述能重测风险控制措施验证项目指数性性性环境达不到相建立厂房清洁消毒规程，定培养基灌装全程对环境进中高高高关生产要求期环境监测并趋势分析行动态监测人员培训并更衣考核上岗，所有相关人员，模拟生产实人员造成污染中高高高每批对进入无菌区人员取际活动后取样，对最多允许样监控人数进行挑战验证灭菌后储存方式和有相关验证操作与正常生产灭菌后的衣服，效期，操作人员培训考核上一致，生产结束后对关键表器具等发生二低高高高岗，生产过程中进行严格监面取样，储存方式和有效期次污染控，生产结束后与产品接触在相关清洁灭菌验证中完表面取样成所有灭菌装载和参数须经灭菌效果未达低高中中过验证，按经验证的操作方在设备验证中完成到式灭菌配液 / 灌封超过按照工艺规定工序最大时低中低中工艺规程中明确规定时限规定时限要求间挑战进行验证灌封设备故障人员培训，使用前通过试模拟维修操作进行挑战验中中低中并维修机，并定期设备维护保养证过滤后对除菌过滤器进行在无菌过滤系统工艺验证过滤系统有效低高高高起泡点测试，使用前进行清中完成，并取过滤后的药液性和污染洁和灭菌处理进行无菌检查所有相关工具，记录等进入取样工具，记录无菌区随厂房消毒，临时需中低高高在消毒效果验证中完成等传入污染要的经酒精消毒和紫外加消毒从传递窗进入清洁工具和清清洁工具需灭菌，清洁消毒在无菌过滤效果和设备验洁消毒剂使用低高高高剂需除菌过滤后进入无菌证中完成带来的污染区在洗烘线验证中完成灭菌灌封所用安瓿工艺规程规定安瓿的灭菌效果和单向流保护，动态监低高高高造成污染参数和暂存时间测灌封前区域，对灭菌后的安瓿进行取样压缩空气带来低中高高压缩空气加终端过滤器，并压缩空气系统验证中完成的污染定期确认过滤器的完整性，周期性进行压缩空气系统验证和监测生产过程中，异常操作造成的中低中中严格异常操作的要求，可能污染的药品报废处理对于模拟中控，倒瓶，倒液，破瓶等情况进行挑战验证风险产品暴露过长挑战工艺规程中允许的最中低高低严格控制允许的灌封速度带来的风险慢速度进行灌封六、验证项目的合格标准与具体活动1确保已完成下列验证和确认工作：WFI 和 PW系统验证HVAC系统的验证压缩空气系统的验证过滤系统的验证无菌区人员更衣确认灭菌系统灭菌效果和储存期确认洗烘灌联动线确认无菌区清洁消毒方法验证恒温恒湿箱确认配制罐的确认无菌分析方法学验证2确保以下文件已有草案或生效某某品种的生产工艺规程某某品种的批生产记录配料岗位SOP工器具处理岗位SOP洗烘瓶岗位SOP灌封岗位SOP各相关设备的清洁、操作和维护保养SOP3验证可接受标准按照《药品生产验证指南2003 版》相关规定：无菌性的可置信限度为95%，产品允许污染概率不得大于 %（即无菌分装药品的无菌保证水平SAL不得低于10-3）。

其合格标准见下表模拟灌装数量/ 瓶污染控制数量/瓶2996～4742≤ 04743～6294≤ 16295～7751≤ 2≥7752≤ 3按照《药品生产质量管理规范2010 版》附录无菌药品第47 条相关规定：养基灌装容器的数量应当足以保证评价的有效性。

批量较小的产品，培养基灌装的数量应当至少等于产品的批量。

培养基模拟灌装试验的目标是零污染，应当遵循以下要求：（一）灌装数量少于5000 支时，不得检出污染品。

（二）灌装数量在5000 至 10000 支时：有 1 支污染，需调查，可考虑重复试验；有 2 支污染，需调查后，进行再验证。

（三）灌装数量超过10000 支时：有 1 支污染，需调查；有 2 支污染，需调查后，进行再验证。

（四）发生任何微生物污染时，均应当进行调查。

综合上述标准，本次验证数量定在 5000~6294 瓶之间，灌装量为2ml ，且其污染数不得超过 1 瓶。

4 验证活动前其他准备工作经确认合格的胰酶酪胨大豆肉汤培养基(TSB)250g× 2 瓶，经湿热灭菌并用橡胶塞封口的无菌取样试管20 支，接触碟60 个，沉降菌培养皿15 个，金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、黑曲霉、生孢梭菌，枯草芽孢杆菌和白色念珠菌等各类菌种，个， 8000 支 5ml 规格的无色安瓿瓶，能控制23~28℃和API 鉴别菌种试纸，经灭菌的具塞三角瓶30~35℃的培养区域以及便于观察和运输的中转10箱若干。

5 工器具灭菌和准备将模拟灌装活动中需要用到的生产工器具、洁净服和设备提前一天进行灭菌，需要使用的消毒剂提前一天进行无菌过滤准备，将无菌操作区提前一天按清洁按相关 SOP要求储存，将SOP要求进行清洁消毒，按生产工艺流程提前一天领取TSB和相关包材存放在车间内。

6 配料配料前取该岗位所需注射用水进行内毒素检查，确保内毒素检验合格后，取胰酶酪胨大豆肉汤培养基(TSB)360g 按《配料岗位操作SOP》加入已清洁灭菌的配料罐中，缓缓加入60℃以上注射用水12L，搅拌 10 分钟使溶成均匀溶液（注：此处按实际生产工艺操作，将其中的原辅料换成 TSB）。

QA用灭菌的具塞三角瓶在配料间取样 50ml，在瓶身标明取样位置、取样数量、取样时间和样品名称后送质检中心测定溶液中微生物负载。

其合格标准应≤1cfu/ml 。

7 除菌过滤用经提前一天灭菌（是否使用前进行完整性测试按新工艺规程定）的μ m聚醚砜除菌过滤器，过滤上述培养基溶液。

QA取50ml× 2瓶过滤完的培养基，在瓶身标明取样位置、取样数量、取样时间和样品名称后送质检中心进行14 天培养的无菌性检查（若有菌生长需对样品进行菌种鉴定），其余量分装于已清洁灭菌的中转储存罐中。

滤芯在过滤完后进行气泡点测试，以确认滤芯的完整性。

另取经除菌过滤的培养基 180ml 分装于 18 支 10ml 的试管中，送质检中心进行培养基的微生物生长实验。

培养基无菌性检查方法：其中一只三角瓶样品在23~28℃培养 14 天；另一支三角瓶在30～ 35℃培养 14 天。

可接受标准：两只三角瓶中的培养基在14 天内应无任何微生物生长。

培养基的微生物生长试验：方法：质检中心QC人员将 QA所取的 18 支样品，在 2 支 10ml 试管中接种枯草芽孢杆菌，接种量＜100cfu/管，另取一支作为空白对照；在 2 支 10ml 试管中接种白色念珠菌，接种量＜100cfu/管，另取一支作为空白对照。