（2007山东）乙醇等“绿色能源”的开发备受世界关注。

利用玉米秸杆生产燃料酒精的大致流程为：（1）玉米秸杆经预处理后，应该选用酶进行水解，使之转化为发酵所需的葡萄糖。

（2）从以下哪些微生物中可以提取上述酶？（多选）A．酿制果醋的醋酸菌 B.生长在腐木上的霉菌C．制作酸奶的乳酸菌 D.生产味精的谷氨酸棒状杆菌（3）若从土壤中分离产生这种酶的微生物，所需要的培养基为（按功能分），培养基中的碳源为。

（4）从生物体提取出的酶首先要检测，以便更好地将酶用于生产实践。

在生产糖液的过程中，为了使酶能够被反复利用，可采用技术。

（5）发酵阶段需要的菌种是，在产生酒精时要控制的必要条件是。

(2008.江苏生物)为探究洗衣粉加酶后的洗涤效果，将一种无酶洗衣粉分成3等份，进行3组实验。

甲、乙组在洗衣粉中加入1种或2种酶，丙组不加酶，在不同温度下清洗同种化纤布上的2种污渍，其他实验条件均相同，下表为实验记录。

请回答下列问题。

（1）提高洗衣粉去污能力的方法有________。

甲组在洗衣粉中加入了________。

乙组在洗衣粉中加入了_________。

（2）甲、乙组洗涤效果的差异，说明酶的作用具有_________。

（3）如果甲、乙和丙3组均在水温为80℃时洗涤同一种污渍，请比较这3组洗涤效果之间的差异并说明理由。

（4）加酶洗衣粉中的酶是特殊的化学物质包裹的，遇水后包裹层很快溶解，释放出来的酶迅速发挥催化作用。

请说明这是否运用了酶的固定化技术及其理由。

（2009.江苏卷）下列关于固定化酶和固定化细胞的叙述，正确的是A．固定化细胞技术在多步连续催化反应方面优势明显B．固定化酶的应用中，要控制好pH、温度和溶解氧C．利用固定化酶降解水体中有机磷农药，需提供适宜的营养条件D．利用固定化酵母细胞进行发酵，糖类的作用只是作为反应底物（2009.江苏卷）酶解法制备原生质体的原理是利用酶溶液对细胞壁成分的降解作用。

蜗牛酶液从蜗牛(以植物为食)消化腺中提取；果胶酶、纤维素酶从微生物中提取。

为了研究不同酶液的酶解效果，某实验小组取无菌烟草幼叶，切成相同大小的小片，等量放入6支试管中，试剂用量和实验结果列于下表。

请回答有关问题。

I ⅡⅢⅣ V Ⅵ试管编号项目蒸馏水(mL) 2 O 1 1 1 1缓冲液(mL) 0 2 1 0.5 0.5 0.5果胶酶液(mL) O 0 O 0.5 O 0蜗牛酶液(mL) O 0 O O 0.5 0纤维素酶液(mL) 0 O 0 O 0 0.5实验结果- - - - +++ ++++ ++(绿色深浅程度)(注：“+”越多表示绿色越深，“一”表示颜色无显著变化)(1)实验过程中，需要轻摇试管，其目的是，使原生质体从叶小片中游离出来，以便观察悬浮液绿色的深浅。

(2)从绿色的深浅可推测：蜗牛酶液酶解效果最好，原因是蜗牛酶液含有等多种酶。

该实验中是空白对照组，其设置意义是。

(3)用网筛过滤原生质体到离心管内，离心后收集沉淀物，并用洗涤。

(4)原生质体是否符合要求还需进行检验，其检验的方法是。

（2009年广东）（1）商品化植酸酶主要来自微生物。

在产酶菌株筛选过程中，常在基本培养基中添加不溶于水的植酸钙制成固体平板，植酸钙被植酸酶分解后可在平板上产生，可根据其大小选择目的菌株，所得菌株需要进一步测定植酸酶活性。

活性测定可以植酸钠作为底物，活性可用一定条件下单位时间的表示。

（2）利用上述所得菌株制备植酸酶的流程如下图：Ⅰ中的主要成分为；Ⅱ中包含植酸酶等多种蛋白质。

请写出一种纯化得到植酸酶的方法及其依据。

（3）为建设基因工程菌，可用PCR等技术从上述菌株中克隆植酸酶基因。

PCR反应包含多次循环，每次循环包括三步：。

反应过程中打开模板DNA双链的方法是。

（2010.江苏卷）右图1表示制备固定化酵母细胞的有关操作，图2是利用固定化酵母细胞进行酒精发酵的示意图．下列叙述正确的是A．刚溶化的海藻酸钠应迅速与活化的酵母菌混合制备混合液B．图1中X溶液为CaCl2溶液，其作用是使海藻酸钠形成凝胶珠C．图2发酵过程中搅拌的目的是为了使培养液与酵母菌充分接触D．图1中制备的凝胶珠用蒸馏水洗涤后再转移到图2装置中（2011.江苏卷）下列有关酶的制备和应用的叙述，正确的是A．酶解法和吸水涨破法常用于制备微生物的胞内酶B．透析、电泳和酸解等方法常用于酶的分离与纯化C．棉织物不能使用添加纤维素酶的洗衣粉进行洗涤D．多酶片中的胃蛋白酶位于片剂的核心层（2012.上海卷）酶在大规模产业化应用中的核心问题是固定化技术，而酶固定化所依据的基本原理在于酶具有A．热稳定性 B．催化高效性 C．催化特异性 D．可反复使用性（2012.江苏卷）下列关于“探究加酶洗衣粉和普通洗衣粉的洗涤效果”的叙述，合理的是A. 先用热水溶解洗衣粉，再将水温调节到最适温度B. 实验的观察指标可以是相同洗涤时间内污渍的残留程度C. 相同 pH 时加酶洗衣粉洗涤效果好于普通洗衣粉D. 衣物质地和洗衣粉用量不会影响实验结果（2012.江苏卷）下列关于酶和固定化酵母细胞的研究与应用的叙述，错误．．的是A.从酶的固定方式看，吸附法比化学结合法对酶活性影响小B. 作为消化酶使用时，蛋白酶制剂以口服方式给药C. 尿糖试纸含有固定化的葡萄糖酶和过氧化氢酶，可以反复使用D.将海藻酸钠凝胶珠用无菌水冲洗，目的是洗去CaCl2和杂菌(2013·江苏高考·T6)下列有关固定化酶和固定化细胞的叙述,正确的是A.可用包埋法制备固定化酵母细胞B.反应产物对固定化酶的活性没有影响C.葡萄糖异构酶固定前后专一性不同D.固定化细胞可以催化各种反应底物的一系列反应(2014·江苏高考·T18)下列关于加酶洗衣粉的叙述,正确的是A.高温易使酶失活,因此冷水洗涤去污效果应该比温水好B.洗衣粉中表面活性剂对碱性蛋白酶活性有一定的促进作用C.在pH低于7.0的自来水中,碱性蛋白酶依然能起作用D.洗衣粉中酶主要是通过快速分解溶在水里的污渍发挥作用(2015·江苏高考·T11)下列关于固定化酶和固定化细胞的叙述,错误的是A.固定化酶的主要目的是实现酶的重复利用B.溶解氧交换受阻是固定化酶应用的重要限制因素C.固定化细胞用于生产能分泌到细胞外的产物D.凝胶与被包埋细胞之间不是通过共价键结合（2015海南卷）生产果汁时，用果胶酶处理果泥可提高果汁的出汁率。

回答下列相关问题：（1）某同学用三种不同的果胶酶进行三组实验，各组实验除酶的来源不同外，其他条件都相同，测定各组的出汁量，据此计算各组果胶酶活性的平均值并进行比较。

这一实验的目的是＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿。

（2）现有一种新分离出来的果胶酶，为探究其最适温度，某同学设计了如下实验：取试管16支，分别加入等量的果泥、果胶酶、缓冲液，混匀，平均分为4组，分别置于0℃、5℃、10℃、40℃下保温相同时间，然后，测定各试管中的出汁量并计算各组出汁量平均值。

该实验温度设置的不足之处有＿＿＿和＿＿＿＿。

（3）某同学取5组试管（A～E）分别加入等量的同种果泥，在A、B、C、D4个实验组的试管中分别加入等量的缓冲液和不同量的同种果胶酶，然后，补充蒸馏水使4组试管内液体体积相同；E组加入蒸馏水使试管中液体体积与实验组相同。

将5组试管置于适宜温度下保温一定时间后，测定各组的出汁量。

通过A～D组实验可比较不同实验组出汁量的差异。

本实验中，若要检测加入酶的量等于0而其他条件均与实验组相同时的出汁量，E组设计＿＿＿（填“能”或“不能”）达到目的，其原因是＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿。

（2015山东）乳糖酶能够催化乳糖水解为葡萄糖和半乳糖，具有重要应用价值。

乳糖酶的制备及固定化步骤如下：（1）筛选产乳糖酶的微生物L时，宜用作为培养基中的唯一碳源。

培养基中琼脂的作用是。

从功能上讲，这种培养基属于。

（2）培养微生物L前，宜采用方法对接种环进行灭菌。

（3）纯化后的乳糖酶可用电泳法检测其分子量大小。

在相同条件下，带电荷相同的蛋白质电泳速度越快，说明其分子量越。

（4）乳糖酶宜采用化学结合法（共价键结合法）进行固定化，可通过检测固定化乳糖酶的确定其应用价值。

除化学结合法外，酶的固定化方法还包括、、离子吸附法及交联法等。

(2015·山东高考·T35)乳糖酶能够催化乳糖水解为葡萄糖和半乳糖,具有重要应用价值。

乳糖酶的制备及固定化步骤如下:(1)筛选产乳糖酶的微生物L时,宜用作为培养基中的唯一碳源。

培养基中琼脂的作用是。

从功能上讲,这种培养基属于。

(2)培养微生物L前,宜采用方法对接种环进行灭菌。

(3)纯化后的乳糖酶可用电泳法检测其分子量(相对分子质量)大小。

在相同条件下,带电荷相同的蛋白质电泳速度越快,说明其分子量(相对分子质量)越。

(4)乳糖酶宜采用化学结合法(共价键结合法)进行固定化,可通过检测固定化乳糖酶的确定其应用价值。

除化学结合法外,酶的固定化方法还包括、、离子吸附法及交联法等。

（2016.江苏卷）为了使牛仔裤呈现“穿旧”效果，在工业洗衣机中用酶洗代替传统的浮石擦洗，是目前重要的生产手段（工艺流程见下图）。

下列叙述中错误的是A．纤维素酶在仿旧中的作用机理与其在洗衣粉中去污的机理相似B．在上述工艺中，为重复使用纤维素酶，可选用适当的包埋剂固定化酶C．在上述工艺中，通过调节温、酸碱度、处理时间可控制仿旧颜色的深浅D．纤维素酶催化葡萄糖残基间磷酸二酯键的水解分解纤维素（2016年4月浙江卷，32，14分节选）请回答与“果汁中的果胶和果胶酶”实验有关的问题：（1）果胶是细胞壁的重要组成成分，其化学本质是______（A．蛋白质 B．脂质 C．核酸 D．多糖）。

它在细胞壁的形成过程中的主要作用是将相邻的细胞___________在一起。

（2）制取果汁时，先用果胶酶将果胶分解成______和半乳糖醛酸甲酯等物质，再用____酶处理，可得到比较澄清的果汁。

用适量且浓度适宜的上述两种酶处理时，果汁的出汁率、澄清度与酶的__________高低成正相关。

（3）由于果胶不溶于乙醇，故可用乙醇对果胶粗提物（经酶处理后的混合物）进行____处理，从而得到干制品。

（2016海南卷）回答下列问题：（1）蛋白酶甲、乙、丙三者的活性随pH的变化如图所示。

通常，用清水洗涤衣服上的新鲜血迹时，不应该使用开水，原因是_______________________。

若要去除衣服上的血渍，应选择含有_____________________（填“蛋白酶甲”、“蛋白酶乙”或“蛋白酶丙”）的碱性洗衣粉，理由是___________________。

（2）某同学为了洗去衣服上的油渍，洗衣时在市售的蛋白酶洗衣液中添加脂肪酶，该同学的做法___________________（填“合理”或“不合理”），理由是_________________________。