高 角 度 （ 5° ～ 15° ） ： 检 测 细 胞 折 射 指 数 （reactive index，RI）；
低角度（2°～3°）：测量细胞大小。
大血小板与各种碎片如果体积相似，但由 于内容物不同，RI相差较大，故能鉴别。
5.网织红细胞计数（reticulocyte，RET） 原理
20世纪90年代起，有多种检测原理相似网 织红细胞分析仪。
血细胞未经任何处理，保持与体内完全相同状态 下进行。
VCS法检测原理 细胞体积技术（测量细胞大小） 电导性技术（测量细胞内部结构） 光散射（scatter, S）技术（测量细胞形态、细
胞核和细胞颗粒）。
体积
电导
光散射
VCS可显示3种细胞散点图 DF1（体积值和散射光值） DF2（体积值和电导值） DF3（体积值和电导值）：只显示basophil
第一群（35～90fl）小细胞区：淋巴细胞 （体积最小）：一般在35～90fl。
第 二 群 （ 90 ～ 160fl ） 是 单 个 核 细 胞 区 ， （中间细胞）：
单核细胞、嗜酸性粒细胞、嗜碱性粒细胞、 原始、幼稚细胞、异常细胞等
第三群（160fl以上）大细胞区：嗜中性粒 细胞（体积最大）：一般在135-350fl
③90°：垂直光散射（70°～110°），测定细胞核 分叶情况。
④90°：消偏振光散射（70°～110°），区分嗜酸 性粒细胞与其他细胞。
2.光散射法红细胞检测原理 低角度(2°～3°)：测量红细胞体积 高角度(5°～15°)：测定红细胞血红蛋白浓
度 得到MCV、MCH、MCHC测定值，计算出RDW、
检测原理分为2类： （一）电阻抗法 1. 电 阻 抗 原 理 (principle of electrical
impedance) ， 又 称 库 尔 特 原 理 （Coulter principle）
Couler计数原理
孔电流
外电极真空 内电极
血细胞 悬液
2.计数部件结构组成 等渗电解质溶液 细胞悬液 小 孔 管 （ 传 感 器 transducer ） 宝 石 孔
细胞流电学和光学散点图（AcT 5diff）
VCS血液分析仪正常白细胞散点图实例
（3）电阻抗与射频法（能透入细胞内，测量核 的大小及颗粒的多少）：
①嗜酸性粒细胞检测系统 ②嗜碱性粒细胞检测系统 ③ 5种白细胞分类检测系统：直流电（direct
current ， DC ） 为 横 坐 标 ， 以 射 频 （ radio frequency ，RF）为纵坐标。 ④幼稚细胞检测系统： 幼稚细胞膜脂质较成熟细胞少。 加入硫化氨基酸，与幼稚细胞的结合量多于较成 熟的细胞 幼稚细胞对溶血剂有抵抗作用，从而提供幼稚髓 细胞信息（immature myeloid information， IMI）。
红细胞血红蛋白分布宽度 （red blood cell hemoglobin distribution width ， HDW）
3.光散射法血小板检测原理 Mie理论（Mie theory of light scatter
for homogeneous spheres）：当球形化 的血小板一个一个通过激光照射区时：
%
10
20
30(fl)
直方图在2～28fl（不同仪器不一）。
血 小 板 平 均 体 积 （ mean platelet volume, MPV）。
（二）光散射法血液分析仪检测原理 组合应用
电学 光学 细胞化学等
细胞流电学和光学检测图（AcT 5diff）
光散射法白细胞检测原理类别 （1）激光与细胞化学法
（直径 <100μm，厚度约75μm）
脉冲数量和大小反映细胞： 数量 体积大小
3.白细胞计数和分类计数原理 仪器将体积为35～450fL的血细胞，分为
256个通道（channel）。 每个通道：1.64fl
根据细胞大小，分别置于不同的通道中， 显示血细胞体积分布直方图 （Histogram）。
经溶血素处理脱水后，血细胞体积大小发 生了变化！！！
三分群血液分析仪正常白细胞分类模式图（直方 图）
%
35 90 160
300 400 450(fl)
仪器组成： ①信号发生器 ② 放大器 ③阈值调节 ④甄别器 ⑤整形器 ⑥计数系统
2.电阻抗法红细胞检测原理 （1）红细胞计数和血细胞比容测定 与白细胞计数相似。(%)
100 200 300 400 (fl)
1）过氧化物酶检测通道： 嗜酸性粒细胞、嗜中性粒细胞过氧化物酶活性比
单核细胞强 淋巴细胞、嗜碱粒细胞无过氧化物酶活性。 散射图定位：X轴为吸光率（酶反应强度）、Y轴
为光散射（细胞大小）显示检测结果。 2）嗜碱性粒细胞/分叶核检测通道。
（ 2 ） 容 量 、 电 导 、 光 散 射 （ volume ， conductivity， scatter, VCS）法：
血液分析仪及其临床应用
血 液 分 析 仪 （ hematology analyzer, HA）：临床血液一般检查最常用仪器。
50 年 代 ， 美 国 库 尔 特 （ W.H.Coulter ） 发 明电子血细胞计数仪并申请专利。
血液分析仪优势： 检测项目多 速度快 精度高 易操作
一、检测原理 检测功能： 细胞计数功能 细胞分类功能
（ 4 ） 多 角 度 偏 振 光 散 射 （ multi-angle polarized scatter separation of white cell, MAPSS）法
①0°：前角光散射（1°～3°），可粗略测定细胞 大小。
②10°：狭角光散射（7°～11°），可测定细胞内 部结构相对特征。
（1）血液分析仪检测原理：
用新亚甲蓝染色使红细胞RNA着色或用荧光 染料对RNA进行染色。
(2)血红蛋白测定：血红蛋白与溶血剂中的 特定试剂结合形成一种血红蛋白衍生物， 在530～550nm下进行比色。
ICSH推荐用氰化高铁法（540nm比色）。
非氰化溶血剂，如SDS-Hb。
(3)红细胞其他参数检测
3.电阻抗法血小板检测原理 血小板计数（platelet, PLT）： 随红细胞在一个系统中进行检测。