前言
为使临床检验操作规范化，指导检验人员严格按规程进行正确的常规操作，保证检验质量，特制定本操作规程。

本规程的编写遵循了ISO 15189《医学实验室——关于质量和能力的特殊要求》及WS/T 227-2002《临床检验操作规程编写要求》的有关规定并结合产品实际情况制订，作为本产品的标准操作程序。

本规程从2007年5月2日起实施，每2年复审1次。

本规程由浙江伊利康生物技术有限公司编制。

本规程起草单位：伊利康生物技术有限公司技术部。

本规程主要起草人：蒙凯、蔡其浩。

本规程首次起草。

目录
1 检验申请 (3)
2 标本采集与处理 (3)
3 试剂及成份 (4)
4方法原理 (4)
5 仪器 (4)
6 校准液及校准模式 (4)
7质控品与室内质控规则 (4)
8标本检测步骤 (5)
9 结果计算 (5)
10 操作性能 (5)
11试剂使用的注意事项 (5)
12参考范围及医学决定水平 (5)
13检验结果的报告及范围 (5)
14临床意义 (6)
15结果审核分析以及相关项目的联系 (6)
16威胁生命的“紧急值”及报告规定. (6)
17有关引用程序与文件 (6)
18参考文献
附录A XXX型生化分析仪参数
直接胆红素测定标准操作规程
1.检验申请
单独检验项目申请：血清直接胆红素（缩写DBIL）测定；组合项目申请：肝功能测定项目组合。

临床医生根据需要提出检验申请。

2.标本采集与处理
2.1 受检者的准备：
病人空腹12h，不饮酒24h后。

体检对象抽血前应有两周的正常状况记录。

注意有无应用影响测试项目的药物。

此外，对于体检者，采血的季节都应做相关记录，因为样本中各项目的含量有季节性变动，为了前后比较应在每年同一季节检验。

应嘱体检对象在抽血前24小时内不做剧烈运动。

2.2标本采集
2.2.1除非是卧床的病人，一般在采血时取坐位。

体位影响水分在血管内外的分布，会影响测试项目的浓
度。

在采血前至少应静坐5分钟，一般从肘静脉取血，使用止血带的时间不超过1分钟，穿刺成功后立即松开止血带，不抗凝，置普通试管中。

或采用含分离胶的黄色盖子SST真空采血管，如为急诊标本，使用浅绿色盖子PST试管。

2.2.2检验申请单和血标本试管上统一且唯一的标识符。

2.2.3标本采集后，在检验申请单上填写标本采集时间，如为急诊标本，加上急查标识。

2.2.4标本采集后与检验申请单一起及时运送至检验科。

专人负责标本的接收并记录标本的状态，对不合
格标本予以拒收。

2.2.5下列标本为不合格标本
2.2.5.1标本量不足：少于0.3ml的全血标本，或少于0.1ml的血清或血浆。

2.2.5.2对反应吸光度有干扰的标本，包括严重溶血和浑浊的标本。

2.2.5.3对无法确认标本与申请单对应关系的。

2.2.5.4其他如标识涂改、标本试管破裂等。

2.4 标本处理：
血标本室温放置30min～45min后离心分离血清或血浆，置洁净试管加盖低温保存。

（血浆标本多主张用1mg/mL EDTANa2抗凝）
2.3标本处理
2.3.1接收标本在30min内将标本离心分离出血清或血浆。

2.3.2标本保存时间：室温（15～25℃）下可稳定1d，普通冰箱中（2～8℃）稳定3d。

为避免标本中水分
挥发使血清浓缩，对保存时间超过1d的标本均加塞密闭或覆盖湿巾。

2.3.3已完成测试的标本保持完整的识别号，置2～8℃冰箱内保存7d。

2.4标本的注意事项
2.4.1采血前使受检者保持平静、松弛和空腹状态。

2.4.2血清标本出现溶血、脂血或抗坏血酸的干扰情况参见抗干扰能力。

3.试剂及成份
3.1试剂
本科使用的直接胆红素检测试剂盒，由浙江伊利康生物技术有限公司生产，产品货号为:XXX，试剂为液体双试剂，其组份如下：
3.2试剂盒保存及效期
未启封试剂盒在2～8℃保存，可储存至失效期。

启封使用的试剂置仪器试剂仓冰箱内至少稳定30d。

开盖后避免污染。

当试剂变混浊，表明试剂已变质，不能继续使用。

不可将试剂配成单一工作液使用。

3.3试剂盒准备
液态试剂型，即开即用，无特殊准备。

4.方法原理
4.1测定方法：终点法。

4.2原理：样本中的直接胆红素易被钒酸氧化成胆绿素，而一定缓冲体系中间接胆红素不被氧化，通过测450nm反应吸光度下降值可求出样本中总胆红素的含量。

5.仪器
XXXX型号仪器。

6.校准品与校准模式
6.1校准品：使用XXXX复合校准血清或使用试剂盒附送的校准液。

不可使用重氮法等非氧化法校准液校准。

6.2标准类型和校准点数目：线性模式，n个校准点。

6.3校准周期：
空白定标：每日需做试剂空白定标。

全点定标：校准间隔时间为1d；批内校准时间30d。

但在:①更换试剂批号或出现质控漂移时；②仪器进行全面保养后；③仪器的重要零件更换后；均须进行一次校准。

①更换试剂批号或出现质控漂移时；②仪器进行全面保养后；③仪器的重要零件更换后；均须需要全点定标。

6.4校准液重建方法：复合校准液用蒸馏水溶解，轻轻混匀，20min后即可使用。

7.质控品与室内质控规则
7.1质控品采用由XXXX公司提供的两个不同水平定值质控血清，产品号为XXX和XXXX。

7.2质控液重建方法：用XXXX.ml蒸馏水溶解，轻轻混匀，20min后即可使用。

7.3质控品测定：在每一批标本中测定至少两个水平质控血清各一次。

7.4质控规则：采用Westgard多规则质控规则，由计算机程序进行检索与判断。

7.5如出现失控情况，按室内质控标准操作程序采取各种有效的纠正措施及时纠正，并在确认重新回复到控制状态后开始标本检测。

8.标本检测步骤
装载试剂→进行校准→进行质控→输入标本检测项目→加载标本→标本测定→结果复核→报告。

9.结果计算
DBIL（μmol/L）= CS×ΔAT/ΔAS（μmol/L）
式中：ΔAT以空白管吸光度作对照的样品管吸光度值
ΔAS以空白管吸光度作对照的校准管吸光度值
C S 校准液中DBIL的浓度
10.操作性能
10.1精密度：批内CV≤4%（n=20）、批间相对极差≤8%
10.2 准确度：测量结果在质控血清靶值±2SD范围内。

不同方法学试剂的质控结果之间会存在差异，使用时请确保质控选择与试剂的方法学保持一致。

10.3线性范围：0.4～300μmol/L（相关系数r≥0.99）
10.4方法的有限性及干扰因素：溶血样品对测定有干扰。

11.试剂使用的注意事项
11.1本试剂仅应用于体外诊断。

11.2扔弃废物应符合当地的法规。

12.参考范围及医学决定水平
正常范围：0.4~6.8μmol/L
13.检验结果的报告及范围
13.1结果的报告
13.1.1结果经审核确认准确无误后发出报告。

13.1.2报告单上标明结果的计量单位、参考区间、报告日期、时间、操作者和审核者签名，并有与申请单相同的医学信息。

13.1.3如收到标本的质量可能对测定结果有影响的也在报告单上指出。

13.2报告范围：血清与试剂用量之比为1:37.5时，测定上限为300μmol/L。

超过此范围的结果报告时必须附有证明该结果准确可靠的文字说明，并经上级主管技师审核后报告。

14.临床意义
14.1胆红素是老化的血红细胞中血红蛋白的代谢产物,血液中总胆红素和直接胆红素的含量测定有利于肝病和黄疸病的诊断。

直接胆红素是红肝细胞代谢后生成，经胆道系统随胆汁一起排泄。

由于各种原因引起的肝内阻塞及肝外阻塞，使胆汁排泄途径受阻或排泄不畅，致使胆汁淤积，肝胆管的内压逐渐升高，导致毛细胆管破裂，直接胆红素经淋巴间隙或血窦进入血液循环，使血中直接胆红素升高。

直接胆红素升高于阻塞性黄疸、如胆石症、肝癌、胰头癌等。

15.结果审核分析以及相关项目的联系
15.1由资深专业人员负责检验结果的审核。

15.2审核者认真审核每一个测定结果，对发出报告结果的可靠性负责，并在报告单的审核者处签名。

15.3相关项目：审核与其它指标的关系。

如出现与临床不符甚至相悖的情况，应分析与查找原因。

16.威胁生命的“紧急值”及报告规定
此项不作规定
17.有关引用程序与文件
17.1XXXX型自动生化分析仪仪器标准操作规程。

17.2生化检验室内质控标准操作程序。

17.3检验结果审核程序。

17.4标本送检和接受程序。

18.参考文献
18.1 . 浙江伊利康生物技术有限公司直接胆红素检测试剂盒说明书。

18.2中华人民共和国卫生部医政司编.全国临床检验操作规程(第三版)东南大学出版社2006
附录A XXX型生化分析仪参数。