（三）ABO血型抗原－存在、结构、遗传、表达 1. 存在部位
完全抗原（如ABH抗原）血细胞、上皮细胞 半抗原（血型物质）：体液、分泌液
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血型物质
血型物质（blood-group substance）分泌性基因Se （FUT2)控制，存在于体液或分泌液中的可溶性 ABH抗原。 分泌型个体：体液、分泌液中含血型物质 非分泌型个体：体液或分泌液中不含血型物质
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质量保证-分析前
方法选择：微柱凝胶正定型 标准血清 试剂红细胞:混合红细胞、洗涤、3%-5%浓度 器材：清洁干燥、试剂有效性、水平离心机 标本：新鲜
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质量保证-分析中
建立sop文件 标记：清楚 试剂、标本：比例、顺序（血清、抗体、细胞） 反应温度与时间：20～24 ℃,37 离心速度、时间: 结果观察:白色背景、震摇，特异性、凝集溶血
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CDE命名法
CDE三个基因位点 三对等位基因 6种抗原（ Cc、Dd、 Ee）连锁遗传 8种基因组合 36种遗传型。
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C c D d E e
C c D d E e
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（三） Rh血型抗原
1、抗原及分布 共50种，常见Cc、D、Ee 含C、D、E抗原：Rh（+） 含cde抗原：Rh（-） 抗原强弱：D>E>C>c>e
判断
正向定型
抗A 抗B + + 抗A,B + + + +
反向定型
A细胞 B细胞 O细胞 + + -
结果 O A B AB
+ +
+
+ -
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2.微柱凝胶卡法
原理 Ag(RBC) + Ab (IgM)_凝胶__凝集
（亲和效应 分子筛效应）
种类：中性凝胶、特异性凝胶、抗人球蛋白凝胶 结果：肉眼观察或血型分析仪 优点：灵敏、准确、特异、标准化、微机化管理 不足：特殊试剂、配套离心机，成本高。
鉴 定 方 法
（含IgG+C3）
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1.盐水介质法
原理： Ag(RBC) + Ab (IgM)_盐水__凝集 应用：血型鉴定，IgM抗体筛查鉴定， 盐水介质交叉配血 方法：试管法、玻片法、微孔板法
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方法评价
试管法： 离心增加凝集，反应时间短, 可发现亚型或弱抗原抗体反应,用于急诊定型, 常规检查方法。 玻片法：简单，普查，不时宜反定型、弱凝集。 微孔板法：大样本血型鉴定，需特殊设备。
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微柱凝胶法血型检测的意图
反应腔
凝胶分离柱
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抗体
离 心
离心开始
离心3分钟
游离红细胞能通过凝胶间隙（1）
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离 心
离心6分钟
离心结束
游离红细胞能通过凝胶间隙（2）
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第五节 血型鉴定及交叉配血
主讲 马丽主任技师
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授课内容
ABO血型系统
Rh血型系统 血型鉴定及交叉配血
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一、ABO ABO 血型系统 血型系统 一、
首个描述的红细胞血型系统，20世纪初由 Landsteiner提出，为最具临床意义的一个系统。
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原则 盐水法 Coombs 蛋白酶 胶体介质 聚凝胺法 微柱凝胶配血 →所有（IgG、IgM）
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→ IgM →无输血和妊娠史
→ IgG→有输血和妊娠史
交 叉 配 血
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Rh分型卡（人源性）
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Rh血型鉴定方法
Coombs、 蛋白酶、 凝聚胺法 盐水介质法（抗D混合血清） 微柱凝胶法
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1.抗人球蛋白（Coombs）试验技术
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抗人球蛋白实验的原理示意图
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Rh血型的质量控制 （自学）
分析前：方法、标本、试剂、器材 分析中：对照、介质、温度、浓度、离心 分析后：结果分析、复核、标本留存
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临床意义
溶血性输血反应 新生儿溶血病
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人与Rhesus
monkey
相同抗原
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（二） Rh血型基因、命名及遗传
ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ

4种命名法：Fisher-Race、wiener、 数字命法、现代命名；

基因位于1号染色体RHD及RHCE； 推荐Fisher-Race (CDE)命名法:简单明了
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血型物质
性质：能与相应的抗体反应 分布：唾液、血清、尿液、羊水等（除CSF） 意义：
9 9 9
辅助鉴定ABΟ血型（唾液） 预测血型 抗体鉴别（中和天然抗体，检测免疫性抗体）
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2.抗原结构
基本物质：多聚糖类血型前体Ⅱ型链； （分泌型抗原的基本物质是血型前体Ⅰ型链） H抗原是形成A、B抗原的结构基础； 基因为H（FUT1）。
阴性反应
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抗体
离 心
离心开始
离心3分钟
凝集红细胞不能通过凝胶间隙（1）
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离 心
离心6分钟
离心结束
凝集红细胞不能通过凝胶间隙（2）
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阳性反应
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试验结果
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临床: 有D抗原→ Rh （+） 无D抗原→ Rh （-）
分布 : 少数民族地区Rh （-）问题
重点： Rh （-）问题
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（四） Rh血型抗体
免疫性、IgG为主， 主要抗体：抗D、E、C、c、e 特点：盐水介质中致敏RBC，肉眼观察不 凝集，判断错误，输血反应。
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1.ABO亚型红细胞上的A抗原
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（五） ABΟ血型的亚型
亚型：同一血型抗原在结构性能和抗原 表位上差异 特征：红细胞抗原数量少，与试剂血清表现 为弱凝集或不凝集。
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二、Rh血型 Rh血型 二、
（一） Rh血型的基本概念
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结构特点
基因→ 转移酶→特异性糖基 +前身物质→ ABH物质→ ABΟ血型 H物质为ABΟ血型共有（oh无） H抗原表达：o>A2> A2B > B >A1> A1B
H抗原性很弱，血清中一般无抗H
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3. 抗原遗传

基因：ABO，位于9号染色体 表型：血型 AA.AO BB.BO → → → → → AB （共现性遗传 ） OO A 型 B 型 AB型 O型
2.酶处理实验技术
原理：破坏RBC表面唾液酸，降低负电 荷；改变RBC结构，暴露隐蔽抗原位点。
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3.聚凝胺介质试验技术 试剂-聚凝胺试剂盒
低离子介质（LIM） 聚凝胺液（polybrene solution） 解聚液（Resuspending solution）中和液
血清IgM(IgG)+RBC —> RBC特异凝集 解聚液中和聚凝胺正电荷，如果是抗体介导 的特异性凝集，加入解聚液后，凝集不消散； 如是聚凝胺引起的非特异性凝集加入解聚液 后，凝集解散。
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4.盐水介质法
单克隆抗D混合血清 （IgG+IgM） + RhD抗原
凝集（肉眼可见）
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三、血型鉴定及交叉配血 三、血型鉴定及交叉配血
（一） ABO血型鉴定 原理：Ab (IgM)+ Ag(RBC)_介质__凝集
正定型(检查Ag)（forward grouping） 反定型(血清Ab) （reverse grouping）
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抗E
+ － － + + － + + － + + － + + + + －
抗e
+ + + － － + + － + － + + + － + － + CcDEe CCDee CcDee CCDEE ccDEE ccDee CCDEe CcDEE CCdee ccdEe CcdEe Ccdee ccdEe CCdEE CCdEe CcdEE ccdee
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