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血液学一般检查实验课


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红 红
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红细胞数/L=N/5*25*201*10*10E6
=(N/100)*1012
五个中方格计数和求均值乘 以中方格数量乘以稀释倍数 将0.1微升体积内的 细胞数换算成升

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【器材】 同红细胞计数,0.5ml吸管 【试剂】 白细胞稀释液:2%冰乙酸溶液 【标本】 EDTA-K2抗凝静脉血或末梢血。

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【操作】
1.加稀释液 吸取白细胞稀释液0.38ml小试管中。 2.采血及加血 颠倒混匀样本,用微量吸管吸取全血20μl, 擦去管尖外部余血。将吸管插入小试管中白细胞稀释液的 底部,轻轻放出血液,并吸取上层白细胞稀释液清洗吸管 2~3次。 3.混匀 待细胞悬液完全变为棕褐色。 4.充池 再次将小试管中的细胞悬液混匀。吸取细胞悬 液1滴,注入计数板的计数池中,室温下静置2~3min, 待白细胞完全下沉后再做白细胞计数。 5.计数 将光圈调到最小,光线调暗,用低倍镜找到计数 区和格子线,用低倍镜(或高倍镜)下计数四角4个大方 格内的白细胞总数。

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6.计算
白细胞数/L=(N/4)*20*10*10E6=(N/20)*109
四个大方格计数和求 均值后乘以稀释倍数 将0.1微升体积内的 细胞数换算成升
【参考值】 ①成人:(4~10)×109/L ②儿童:(15~20)×109/L;6个月~2岁: (11~12)×109/L。 ③新生儿:(15~20)×109/L

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【注意事项】

类似于红细胞计数。
应注意白细胞较红细胞少,因此充池更加注重均 匀。 稀释倍数,因细胞多少而异。
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试验结束后



将用过的标本、盖玻片、微量吸管和纸屑等丢到 大垃圾桶 将玻璃试管用水冲洗干净倒插入试管架中 将牛鲍计数板冲洗干净放入盒中 将显微镜按照背后的号码还原至盒中 关闭电灯,拔下插线板
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【器材】 试管、试管架。 2 ml吸管、吸耳球。 微量吸管、胶吸头、干脱脂棉。 玻璃棒。 改良Neubauer计数板、盖玻片、绸布。 显微镜。
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Micropipettes
Markers:
10ul
20ul
Warning line
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【参考值】 ①成年人:男性(4.09~5.74)×1012/L,女 性 (3.68~5.13) ×1012/L。 ②新生儿:(5.2~6.4) × 1012/L。 ③婴儿:(4.0~4.3) ×1012/L。 ④儿童:(4.0~4.5) ×1012/L。
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【注意事项】



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血液学一般检查
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【目的】 掌握显微镜红细胞(red blood cell count, RBC)计数的原理及操作方法。 【原理】 用等渗稀释液将血液以一定倍数(200 倍)稀释并充入计数池,在显微镜下计数一定区域 内的红细胞数量,经换算求出每升血液中的红细 胞数量。

【试剂】 红细胞稀释液:枸椽酸钠1.0 g , 36%甲醛液1.0ml,氯化钠0. 6 g,加蒸馏水至 100 ml,混匀,过滤两次后备用。 【标本】 EDTA-K2抗凝静脉血或末梢血。

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【操作】 1.加稀释液 红细胞稀释液2 ml 于小试管。 2.采血及加血 颠倒混匀样本,用微量吸管吸取 全血10μl,擦去管尖外部余血。将吸管插入小试 管中红细胞稀释液的底部,轻轻放出血液,并吸 取上层红细胞稀释液清洗吸管2~3次。 3.充池 充入计数池,放置2~3 min 。 4.计数 将光圈调到最小,光线调暗,用低倍镜 找到计数区和格子线,用高倍镜计数中央大方格 内4角和正中,共5 4.稀释液及稀释倍数 5.采血 6.充池 7.计数
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白细胞计数
【目的】 掌握显微镜法白细胞计数(white blood cell count)的方法。 【原理】 采用白细胞稀释液将血液稀释一定的 倍数,同时破坏溶解红细胞。将稀释的血液注入 血细胞计数板,在显微镜下计数一定体积内的白 细胞数,经换算即可求出每升血液中的白细胞数 量。
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