含量测定
采用正相HPLC法 根据样品纯度，ChP采用三种方法 第一法（适用于无VitA醇及其它杂 质干扰） 对照品（ D2 、D3 ）+异辛烷→超声 助溶，充氮，避光0℃保存 内标液：邻苯二甲酸甲酯-正己烷溶 液 色谱柱：硅胶柱 流动相：正己烷-正戊醇（997：3） 检测波长：254nm
中国药典收载方法
第一法（维生素A醋酸酯的测定） 将维生素A溶于环己烷，在规定波长测定 吸收度，计算吸收度比值（A/A328 ）
称盐酸硫胺，结构特点： 有两个碱性基团，有紫外吸收，在水中易溶
沉淀反应
鉴别反应
氯化物反应——本品为盐酸盐，显氯化物反应 硝酸铅反应——与氢氧化钠共热，分解产生硫化钠， 与硝酸铅生成黑色沉淀
糖类性质
维生素C+三氯乙酸→水解成戊糖→失水 →糠醛+吡咯→蓝色
杂质检查
澄清度与颜色——控制氧化变色产物，以测定一定 波长下吸光度控制有色杂质 原料——溶液应澄清无色，若有色，在420nm处测 定吸光度，不得过0.03 片剂——在440nm处测定吸光度，不得过0.07 注射剂——在420nm处测定吸光度，不得过0.06 铁、铜离子——采用原子吸收分光光度法测定
维生素D的分析
为一类抗佝偻病的维生素总称，都是甾醇的衍生物， ChP收载维生素D2（Ergocalciferol）， D3 有多个烯键，不稳定，易氧化变质，使毒性增加，多个 手性碳，具旋光性
鉴别试验
显色反应（甾类化合物的反应） D2+醋酐-浓H2SO4 →黄→红→紫→绿色 D3+醋酐-浓H2SO4 →黄→红→紫→蓝绿→绿色 比旋度[α]tD测定 D2无水乙醇液：+102.5°～+107.5 ° D3无水乙醇液：+105°～+112° D2 、D3区别反应 维生素D的醇溶液+85% H2SO4
维生素C注射液含量测定
精密量取本品适量（约相当于维生素C0.2g） 加水15mL与丙酮2mL，摇匀，放置5min，加 稀醋酸4mL与淀粉指示液1mL，用碘滴定液 （0.1mol/L）滴定，至溶液显蓝色并持续30s 不褪。每1mL碘滴定液（0.1mol/L）相当于 8.806mg的C6H8O6 注意：滴定前加丙酮是用来消除注射液中含 有的抗氧剂亚硫酸钠对测定的干扰，丙酮与 亚硫酸钠形成加成物而消除影响
含量测定
紫外分光光度法（三点校正法） 维生素A醋酸酯的环己烷溶液在 328nm有最大吸收，吸收系数 E=1530 维生素A醇的异丙醇溶液在325nm 有最大吸收，吸收系数E=1820 由于维生素A中稀释用油和有关杂质 也具有紫外吸收，干扰测定，故采 用三点校正法测定含量
等波长差法
等吸收差法
含量测定
碘量法——维生素C分子中的烯二醇基具 有还原性，能被I2定量的氧化成二酮基
测定方法
取本品约0.2g，精密称定，加新沸过的 冷水100mL与稀醋酸10mL，振摇使溶 解，加淀粉指示液1mL，立即用碘滴定 液（0.1mol/L）滴定，至溶液显蓝色并 持续30秒钟不褪。每1mL碘滴定液 （0.1mol/L）相当于8.806mg的C6H8O6 讨论：滴定前加入稀醋酸可减缓维生素 C受空气氧化，用新沸过的冷水做溶剂， 除去水中溶解氧对测定的影响 维生素C片也采用碘量法测定含量，但 需过滤除去辅料
维生素C的分析
结构特点
二烯醇结构，有强还原性 C3显酸性，可成钠盐 具共轭双键，有紫外吸收 两个手性碳，有旋光性 水中易溶，有糖类性质
鉴别试验
硝酸银反应——维生素C被氧化，银被还原成黑色 银沉淀 使高锰酸钾、亚甲蓝褪色 与碱性酒石酸铜作用，产生红色氧化铜沉淀 二氯靛酚钠反应——二氯靛酚被还原成无色
维生素E分析
结构特征：具有苯并二氢吡喃结构，苯环 上有1个乙酰化的酚羟基，易被水解、氧 化；为脂溶性维生素。
鉴别
与硝酸反应——维生素E与硝酸共热， 显橙红色（生育红） 水解后氧化反应——维生素E在碱性 条件下水解，与联吡啶和三氯化铁 作用，显血红色。在该反应中，维 生素E水解游离出生育酚，氧化 Fe2+→Fe3+ ，后者与联吡啶生成血 红色配位离子
结构特点： 环己烯+共轭多烯侧链 天然VA侧链为全反式 天然来源主要是鱼肝油，人工 合成醋酸酯，棕榈酸酯
鉴别试验
三氯化锑反应：维生素A+三氯化锑→显蓝色→ 渐变成紫红色 紫外吸收光谱：维生素A的无水乙醇-盐酸溶液 在326nm波长处有单一吸收峰，将该溶液加热 后再测定，在348，367，389nm处出现3个尖 锐吸收峰。这是维生素A在盐酸催化下加热， 发生脱水反应所致
维生素类药物 的分析
主要内容 维生素A 维生素D 维生素E 维生素B 维生素C
脂溶性
水溶性
维生素
性物质
维持人体正常生理机能所必须的生物活 10%油、脂肪 及甜品 10%肉类、蛋类 制品
10%乳类制品
18%蔬菜
12%水果
40%谷类和麦类主食
人体缺少某种维生素，就会引 起维生素缺乏症，而影响人体 的正常生理机能。 例如： VA——夜盲症 VB1——脚气病 VD缺乏——佝偻病
维生素B1在氢氧化钠溶液中，与铁氰化钾作用，被氧化成硫 色素，在正丁醇中显蓝色荧光，加酸，荧光消失，加碱，荧 光又出现 这是维生素B1的专属反应
硫色素反应
含量测定
非水溶液滴定法 用于原料药测定 加醋酸汞消除盐酸干扰 1mol维生素B1与2mol高氯酸相当 紫外分光光度法 片剂、注射剂采用此法 以吸收系数法计算含量 硫色素荧光法 对照品对照法 计算含量，方法专 属，不受氧化产物干扰
按溶解性分类 脂溶性：VA、VD、VE、VK等 水溶性：B族，VC、烟酸、叶 酸、泛酸等
维生素A的分析
结构特点：具有共轭多烯侧链的环己烷， 有多种异构体 性质：有强紫外吸收，易被氧化，脂溶性
维生素A醇 维生素A醋酸酯 维生素A棕榈酸酯
结构特点： 环己烯+共轭多烯侧链 天然VA侧链为全反式 天然来源主要是鱼肝油，人工 合成醋酸酯，棕榈酸酯