培养基制备与灭菌
察氏培养基(培养霉菌用)
蔗糖 20克 NaNO33克 K2HPO41克 KCl1克 MgSO40.5克 FeSO40.01
克 琼脂20克 水1000毫升自然pH
无氮培养基(培养自生固氮菌用)
葡萄糖 10克 NaCl0.2克 KH2PO40.2克 CaSO4·2H2O0.1克 MgSO40.2 克 CaCO35克 琼脂 20克水1000毫升自然pH
如：在青霉素生产中加入玉米浆，青霉素产量可从20u/mL增加 到100u/mL，研究发现玉米浆中的苯乙胺被有限结合到青霉素分 子中，从而提高了青霉素G的产量。
培养基制备与灭菌
2）、促进剂：指那些既不是营养物又不是前 体，但却能提高产量的添加剂。
比如在酶制剂发酵过程中，加入诱导物、表明活性剂及其它一些 产酶促进剂（比如吐温80、植酸、洗衣粉等）
缺点：高温高压下进行，设备要求耐腐蚀、耐高温、
原料来源、成本及工艺管理；
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培养基配方举例
牛肉膏蛋白胨培养基(常用的细菌培养基)
牛肉膏5克 蛋白胨10克 NaCl5克 水1000毫升 pH7.2～7.4 (琼脂15～20克)
高氏一号培养基(常用的放线菌培养基)
可溶性淀粉20克 KNO31克 K2HPO40.5克 MgSO40.5克 NaCl 0.5克 FeSO40.01克水1000毫升琼 脂15～20克pH7.4～7.6
2）半固体培养基 再配置号的液体培养基中加入0.5%左右的琼
脂作为凝固剂，形成的培养基称之微半固体培 养基。 主要用于菌种鉴定，观察细菌运动特征及噬菌 体的效价测定等
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3）液体培养基； 培养基中80～90%是水。
培养基制备与灭菌
3.依培养基的用途来分 1）、孢子培养基 2）、种子培养基 3) 、 发酵培养基 4）、补料培养基 5）、加富培养基 6）、选择培养基 7）、鉴别培养基 8）、增殖和保存培养基 9）、富集培养基 10）、测定培养基
B、非可逆性凝固培养基：指有血清凝固成的固体培 养基或由无机硅胶配成的凝固后即不能再融化的固体 培养基
C、天然固体培养基：由天然固体状基质直接制成的 培养基，如麸皮，米糠ห้องสมุดไป่ตู้木屑等
D、滤膜：是一种坚韧且带有无数微孔的醋酸纤维薄 膜，把它制成圆片状覆盖再营养琼脂或浸有培养液的 纤维衬垫上，就形成了具有固体培养基性培养质基制的备培与灭养菌 条
培养基制备与灭菌
三、发酵培养基的选择
一）、配置培养基的原则 1、根据不同微生物的营养需要配置不同的培养基 2、注意各营养物质的浓度和配比 3、调节适宜的物理化学条件 4、根据培养微生物的目的配置 5、尽量使用廉价易得的原料
培养基制备与灭菌
二）、配置培养基的方法
1、生态模拟 2、查阅文献 3、借助优选法或正交试验法精心设计培养基配方 4、实验比较 实验的规模一般由定性到定量，由小到大。 发酵培养基的用途与要求、成分、配比经实验确定，配制时兼顾
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5.特殊生长因子：硫胺素、生物素、对氨基苯 甲酸、肌醇等
功能：酶的辅助部分，维持生命活动；
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6．发酵的促进剂与抑制剂 发酵培养基中某些成分的加入有利于调节产物
的形成，而并不促进微生物的生长，这些物质 包括前体、促进剂和抑制剂
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1）、前体：指某些化合物加入到发酵培养基中， 能直接被微生物在生物合成过程中结合到产物 分子中去，而其自身的结构没有多大的变化， 但产物的产量却因加入前体而有较大的提高。
第二章 培养基的制备与灭菌
培养基制备与灭菌
第一节 培养基的原材料
一、培养基的营养成分及用途
1.能源
光
光能自养 自养菌
氢、硫、氨
化能自养
亚硝酸盐、亚铁盐
碳水化合物等有机物
石油天然气和石油化工产品（如醋酸） 异养菌
功能：生长、繁殖需要；
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2.碳源
碳酸气 淀粉水解糖、糖蜜、亚硫酸盐纸浆废液等 石油、正构石蜡、天然气 醋酸、甲醇、乙醇等石油化工产品
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3）、抑制剂：在发酵过程中加入抑制剂会抑制某些代 谢途径的进行，同时会使另外一些代谢途径活跃，从 而获得人们所需要的某种产物或使正常代谢的某一代 谢中间物积累起来。
例如：微生物发酵生产甘油中，例如亚硫酸氢钠， 它与代谢过程中的乙醛生成加成物。
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7.水分 功能：生化反应均在水溶液中进行
伊红-美蓝培养基(检查肠道细菌用)
蛋白胨 10克 K2HPO42克乳糖10克琼脂25克，水1000毫升，pH7.6 2％伊红水溶液2毫升0.5％美蓝水溶液2毫升将乳糖、伊红、美蓝分别
灭菌后，加入灭菌的培养基中摇匀，倒平板。
培养基制备与灭菌
四、原料转换及意义 1、节约原料，减低单耗，提高发酵单位和总
收率；
2、开拓新的原料资源和微生物资源：野生植 物淀粉、植物纤维、木屑水解物、石蜡、醋酸、 乙醇
培养基制备与灭菌
第二节 淀粉水解糖的制备
一、淀粉水解糖的制备方法
1、酸解法：
定义：以酸（无机酸或有机酸）为催化剂，在高温高 压下将淀粉水解为葡萄糖的方法.
优点：设备要求简单，水解时间短（20min），设备 生产能力大
培养基制备与灭菌
二、培养基的类型
1.依营养物质的来源分类 天然培养基； 合成培养基，也称组合培养基（多用于定量研究）； 半合成培养基，（用的最多，在部分天然有机碳源、
氮源、生长因子的基础上，适当加入一些化学药品）；
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2.依培养基的物理状态来分：
1）固体培养基
A、凝固培养基 ：即遇热可融化，冷却后则凝固的固 体培养基
功能：提供能量、构成菌体、代谢产物的物 质基础；
培养基制备与灭菌
有机氮：黄豆饼粉、花生饼粉、玉米浆、蛋白胨、
3.氮源
酵母粉、鱼粉、发酵菌丝体、酒糟水等
无机氮： 尿素、硫酸铵、氨水、硝酸盐
功能：构成菌体、含氮代谢物；
培养基制备与灭菌
磷酸盐、钾盐、钙盐等矿物盐
4.无机盐
铁、锰、钴等微量元素
功能：构成菌体，参与酶的组成，维持酶活 性，调节渗透压，调节pH值，维持氧化还原 电位；