调 整豆科 植 物 花 器 的形 状 和 大 小 是 完 全 有 可 能
的 ．
收 稿 日期 ：０ ０一ｏ ２１ ９—２ ８
来越 受关 注 引． 向 电泳 技 术 体系 的优 化是 蛋 双
白质 组学 研究 的前 提 和 基 础 ， 文 针 对 大豆 花瓣 本 含有 大量 色 素和 酚 等 干 扰 物质 的现 象 ， 比较 ６种 蛋 白提取 方法 和 ２种 蛋 白裂解 液 配 方 ， 化 蛋胶 优 条 范 围和 等 电聚 焦 程序 ， 步 建 立 了 一套 适 合 大 初
裂 解液 配方 ， 化胶 条 范 围和 等 电聚 焦程序 ． 果表 明 ：Ｈ 为 ４～ Ｐ 优 结 ｐ ７ ＩＧ胶 条 适 于 大
豆全 花蛋 白分 离； Ｃ ／ Ｔ Ａ 丙酮 ＋２ ｌａ ｐ试 剂盒 法去 除 杂质 充 分 ， 取 的蛋 白含 量 Ｄ ＣｅｎＵ 提
高、 纯度 好 、 离效 果 佳 、 时 短 ； 白裂 解 液 采 用 ５ ｍｏ Ｌ尿 素 ， 硫 脲 ， ％ 分 耗 蛋 ｌ ／ ２Ｍ ２
第２ ６卷
第 ６期
哈尔滨师范大学 自然科学学报
ＮＡ ＲＡＬ Ｓ Ｉ Ｃ ＯＵＲＮ ＴＵ Ｃ ＥＮ ＥＳ Ｊ ＡＬ ＯＦ ＨＡＲＢＩ Ｎ ＮＯＲ ＭＡＬ ＵＮＩ ＲＳ ＴＹ ＶＥ Ｉ
Ｖ １ ６ Ｎ ． ０ ０ ｏ ２ ． ｏ６２ １ ．
大 豆 花 瓣 蛋 白双 向 电泳 分 析 技 术 体 系 的 优 化 水
ＣＨＡＰ ２ Ｓ ３—１ ５ ｍｍｏ／ Ｅ ２ Ｓ， ％ Ｂ ０， ｌ Ｌ ＴＣ Ｐ，０ ｍｍｏ／ ＴＦ ０ ５ Ｉ Ｇ ｆ ｒ为 好 ； 加 ｌ Ｌ Ｄ ， ． ％ Ｐ Ｂｕ ｅ 增
离心转速 、 间和 丙酮 清洗 次数 能促进 蛋 白溶 解 ， 时 增加 蛋 白纯 度 ， 步 建 立 了一套 适 初
郑天 慧， 宋 波 ， 自芹 ， 姜 刁桂 珠 ， 曾 蕊， 吴 帅 ， 拓 云 ， 珊 珊 一 刘
（ 东北农业大学 ）
【 摘要】 双向电泳技术体 系的优化是蛋 白质组 学研 究的前提 和基础． 本文针对 大 豆花辫含 有大量 色素和 酚等 干扰 物质 的现 象 ， 比较 ６种蛋 白提 取 方 法和 ２种 蛋 白
雄 蕊 和柱 头 ， 花药 和柱 头不 外露 ， 花 间的 昆虫 传 异 粉及 风媒传 粉 难 以进行 ， 易落 花落 荚 ， 田中大 且 大 豆 的异花 授粉 率 不 足 １ ， 使 大规 模 的杂 交 育 ％ 致 种 需 要大量 的人 力 物 力 ， 大 的 限制 了大 豆 杂 交 极
育 种 的发展 和 杂 种 优 势 的利 用 一 ． 索 大 豆 花 ¨探 型形成 的分 子基 础 ， 以帮 助 我们 明晰 大 豆 花 型 可
合 大豆全 花蛋 白双 向 电泳分析 的技 术体 系．
关键词 ：大豆 花 瓣 ； 向 电泳 ； 术体 系 ； 双 技 优化
大 豆是一 种严 格 的 自花授 粉作 物 ， 花器小 ， 花 多， 花粉粘 重 ， 花朵 开放 前 翼瓣 和龙 骨瓣 紧 紧包 住
０ 引言
花 器 官 的 正 常 发 育 是 植 物 赖 以 繁 衍 的 基 础 … ，Ｏ世纪 ８ ２ Ｏ年代 以来 ， 随着 分 子 遗传 学 手 段 的运 用 ， 助 于现 代 生 物 技 术 结合 模式 植 物 拟 南 借 芥 和金 鱼草 的花 发 育 突 变体 ， 发 育研 究 在 短 短 花 十几 年 内获得 了突飞猛 进 的发展 ． 目前 ， 于 豆科 关 植物 花 型的研 究表 明 ： 鱼 草 Ｔ Ｐ ｄｍａ 金 Ｃ ｏ ｉ 因家 ｎ基 族 的 Ｃ ｃ Ｄｃ ｙ和 ｉ ｈ基 因 的主 要 功 能是 控 制 金 鱼 草 花 的不对 称性 发 育 和 花器 官 的对 称 性 ． Ｃ ｃ和 当 ｙ Ｄ ｃ 因双 突变 时 ， 鱼 草 花 由两 侧 对 称 转 变 为 ｉ ｈ基 金 辐射对 称 ， 其背 部 和侧部 花瓣 的形 状也 发 生改 变．
另有报 道 ， 在豆 科模 式植 物 百 脉 根 中 Ｔ Ｐｄｍ ｉ Ｃ ｏ ａｎ 基 因家族 的 Ｌ ｙ２基 因不 仅参 与 了百 脉根 花 背腹 ｊｃ ｃ 极 性 的建立 ， 而且 还 参与 了花 序 的发育 ， 花序 的 与 结 构有关 口３． ． 以上 结果 表 明 ， 过 遗 传 学 的手 段 】 通
ห้องสมุดไป่ตู้
发 育 的分子 机 制 ， 而 能 动 的调 控 大 豆 花 型 的 大 从
小与结构 ， 对提高大豆产量有重要 的理论与实践
指 导意 义．
蛋 白质 组学 分 析 是 目前 分 离 、 鉴定 蛋 白表 达 差 异最 为有 效 的研 究 手 段 ， 技 术 不 仅 在人 类 以 该 及 越来越 多 的微 生 物 中广 泛 研究 ， 植 物 中出 越 在
通 讯 作 者
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哈 尔 滨师 范 大 学 自然科 学 学 报
２１ ００拒
豆全花 蛋 白双 向电泳 分 析 的技术 体 系 ， 进 一步 为 深入开 展大 豆花型发 育蛋 白质组学研究 奠定 良好
的技术基 础 ．
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国 家 自然 科 学基 金 资 助项 目（ １ ７４ ０ ； 龙 江 省 普 通 高 等 学 校 青 年 骨 干 支 持 计划 项 目（ １ ５ ２ ； 士 后 研 究 人 员 落 户 黑龙 江 科 研 ３０ １４ ） 黑 １５ Ｇ１ ） 博
启动项 目（ ０ ９ ０ ９ ； ２０ ＨＢ ０ ） 转基 因生物新品种培育重大专项子任务 ： 抗病 虫转基 因大豆新 品种培育 资助项 目（ ０８ Ｘ ８０ ０ ４ ２０ Ｚ ０ ０４— ０ ）