专题2 微生物的培养与应用
课题2 土壤中分解尿素的细菌的分离与计数教学设计
金堂县竹篙中学谭善财2013-3-16
一．本节课内容的总体目标
二、教学重点与难点
课题重点：对土样的选取和选择培养基的配制课题难点：对分解尿素的细菌的计数
三、课时： 1h
四、本课题内容标准
1、研究培养基对微生物的选择作用，“研究”属于知识性领域的目标动词，应用水平
2、进行微生物的分离，“进行”属于技能性领域目标动词，独立操作水平
3、测定某种微生物的数量，“测定”属于技能性领域目标动词，独立操作水平。
五、本课题研究思路
六、教学思路：
七、教学流程
八、教学过程
教学内容
教师活动
学生活动 设计意图
复习提问
1.微生物最常用的两种接种方法是什么？
2.什么稀释涂布平板法？其目的是什么？ 学生回忆 为细菌计数原
理、操作做好铺
垫
导入课题 引导学生阅读“课题背景”知识，提出的问题。
学生自主学习 回答问题
创设情景，引入
新课，使学生明
确分解尿素的细
菌的重要性，突出课题的必要性
研究思路
1、筛选
菌株1、教师让学生阅读课本P21，讲解：DNA聚合酶作
用，发现过程。
引导学生得到启示根据它对生存环
境的要求，到相应的环境中去寻找（即自然界筛
选）。
2、实验室中微生物的筛选原理实验室筛选：人为提
供有利于目的菌株生长的条件（包括营养、温度、p
H等），同时抑制或阻止其他微生物生长。
3、教师展示各种筛选菌株方法的多媒体图片：
黄石公园热泉海
底火山
大肠杆菌显色培养基实验室筛选SARS
菌株
4、培养基选择分解尿素的微生物的原理：培养基的
氮源为尿素，只有能合成脲酶的微生物才能分解尿
1、DNA聚合酶发
现过程，同学们得
到什么启示？
2.学生讨论为什么
Taq细菌能从热泉
中筛选出来吗？
3、学生阅读课
本P22侧边栏关于
本课题使用的培养
基成分相关内容，
讨论并回答提供碳
源和氮源的分别是
什么物质。
4.学生分析讨
论，以尿素为唯一
氮源的培养基能否
筛选出分解尿素的
细菌
3、学生观看教
师展示的多媒体图
片。
4、学生讨论培
养基如何对微生物
进行筛选。
引导学生对知识
进行迁移学习，
培养学生的逻辑
迁移思维。
通过观看图片，
使学生由感性认
识过渡到理性认
识。
培养学生的
学科素养。
素，以尿素作为氮源。
缺乏脲酶的微生物由于不能分解尿素，缺乏氮源而不能生长发育繁殖，而受到抑制，所以用此培养基就能够选择出分解尿素的微生物。
5、选择培养基：在微生物学中，将允许特定种类的微生物生长，同时抑制或阻止其他种类微生物生长的培养基。
目的是从众多微生物中分离所需要的微生物。
2、统计菌落数目1、直接计数法：最常用的显微镜直接计数，指出优
缺点。
2、间接计数法：最常用方法稀释涂布平板法。
C：某一稀释度下平板上生长的平均菌落数
V：涂布平板时所用的稀释液的体积（ml)
1、学生讨论能否
用来计数土壤中的
活菌数。
2、学生讨论并区
别：稀释涂布平板
法是用来计数的，
而平板划线法是用
来纯化的。
知识的迁移，培
养学生的知识整
合能力。
M：稀释倍数
每克样品中的菌株数＝（C÷V）×M
3.教师提出计数过程中应注意那些问题
3、设置对照1、实例：在做分解尿素的细菌的筛选与统计菌落数
目的实验时，A同学筛选出约150个菌落，但其他同
学只选择出约50个菌落，分析其原因。
教师要求学
生设计实验方案。
2、对照实验是指除了被测试的条件外，其他条件都
相同的实验。
满足该条件的称为对照组，未满足该
条件的称为实验组。
设置对照的主要目的是排除实
验组中非测试因素对实验结果的影响，提高实验结
果的可信度。
学生设计实验方
案：
方案一：由其他同
学用与A同学相同
土样进行实验；
方案二：将A同学
配制的培养基在不
加土样的情况下进
行培养，作为空白
对照，以证明培养
基是否受到污
染。
小结：通过这个事
例可以看出，实验
结果要有说服力，
对照的设置是必不
可少的。
培养学生的怀疑
精神，并根据自
身设计实验方案
进行验证。
培养
学生的实验设计
能力。
1、教师讲解样品的稀释和稀释液的取样培养流程示
意图。
学生讨论思考下列
问题：
1、如何从平板上
的菌落数推测出每
克样品中的菌落
数？
答：统计某一稀释
通过实验设计，
培养学生设计实
验方案能力，培
养学生的学科素
养。
体验无菌操
作的实验过程。
实验设计
2、土壤取样：
从肥沃、湿润的土壤中取样。
先铲去表层土3cm左
右，再取样，将样品装入事先准备好的信封中。
3、制备培养基和样品的稀释：
制备以尿素为唯一氮源的选择培养基，并按一定倍
数稀释。
4、微生物的培养与观察：
每隔24h统计一次菌落数目。
选取菌落数目稳定时
的记录作为结果。
度下平板上的菌落数，最好能统计3个平板，计算出平板菌落数的平均值，然后按课本旁栏的公式进行计算。
2、为什么分离不同的微生物要采用不同的稀释度？
答：因为土壤中各类微生物的数量（单位：株/kg）是不同的，为获得不同类型的微生物，就需要按不同的稀释度进行分离，同时还应当有针对性地提供选择培养的条件。
操作提示1、无菌操作
a、取土用小铁铲、盛土样信封在使用前都需要灭
菌。
b、应在火焰旁称取土壤。
在火焰附近将称好的土样
倒入锥形瓶中，塞好棉塞。
c、在稀释土壤溶液的过程中，每步都要在火焰旁操
作。
2、做好标记
学生讨论实验过程
的注意事项。
培养学生的创新
思维。
注明培养基种类、培养日期、平板培养样品的稀释度等。
3、规划时间
结果分析与评价1、培养物中是否有杂菌污染以及选择培养基是否筛
选菌落
2、样品的稀释操作是否成功
3、重复组的结果是否一致
学生交流成果，分
析自己的成功之处
和需要改进的地
方。
培养学生学会对
别人评价和自我
评价的能力
课题延伸在以尿素为唯一氮源的培养基中加入酚红指示剂。
培养某种细菌后，如果PH升高，指示剂将变红，说
明该细菌能够分解尿素
脲酶的检测
学生了解酚红指示
剂的作用，通过对
比
七、板书设计
九、课堂巩固
1.使用选择培养基的目的是（）
A.培养细菌
B.培养真菌
C.使需要的微生物大量繁殖
D.表现某微生物的特定性状与其他微生物加以区别
2.能合成脲酶的微生物所需要的碳源和氮源分别是( )
A.CO2和N2
B.葡萄糖和NH3
C.CO2和尿素
D.葡萄糖和尿素
3.下列说法不正确的是（）
A.科学家从70－80度热泉中分离到耐高温的TaqDNA聚合酶
B.统计某一稀释度的5个平板的菌落数依次为M1、M2、M3、M4、M5，以M3作为该样品菌落数的估计值
C.设置对照实验的主要目的是排除实验组中非测试因素对实验结果的影响，提高实验结果的可信度
D.同其他生物环境相比，土壤中的微生物数量最大，种类最多。
4.酵母菌能在青霉素的环境中生存而细菌一般不能，为培养和分离出酵母菌并淘汰杂菌，常在培养基中加入（）
A.较多的氮源物质
B.较多的碳源物质
C.青霉素类药物
D.高浓度食盐
5. 用来判断选择培养基是否起到了选择作用需要设置的对照是
A．未接种的选择培养基 B．未接种的牛肉膏蛋白胨培养基
C．接种了的选择培养基 D．接种了的牛肉膏蛋白胨培养基
6. 请选出下列正确的取样培养操作步骤
①土壤取样②称取10g土壤取出加入盛有90ml无菌水的锥形瓶中③吸取0.1ml进行平板涂布④依次稀释至101、102、103、104、105、106、107稀释度A．①②③④ B．①③②④
C．①②④③ D．①④②③
7.(2011·揭阳模拟)下列关于微生物分离和培养的有关叙述，错误的是( )
A．微生物培养前，需对培养基进行消毒
B．测定土壤样品中的细菌数目，常用菌落计数法
C．分离土壤中不同的微生物，要采用不同的稀释度
D．分离能分解尿素的细菌，要以尿素作为培养基中唯一的氮源
8.可以鉴定出分解尿素的细菌的方法是( )
A．以尿素为唯一氮源的培养基中加入酚红指示剂
B．以尿素为唯一氮源的培养基中加入二苯胺试剂
C．以尿素为唯一氮源的培养基中加入苏丹Ⅲ试剂
D．以尿素为唯一氮源的培养基中加入双缩脲试剂。