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下一页考值】正常人的粒细胞、淋巴细胞中不能检出NAPase的活性。 【临床评价】在AML及CML慢性期、CML急性变的原 粒细胞中，均不能检出N-APase。但在ALL和CML急淋变 时，原始淋巴细胞能检出N-APase，且不仅在非T-ALL、 非B-ALL的幼稚细胞，就是在T-ALL及具有B细胞标记物 的原始细胞中亦可检出。因此，认为此酶是从未成熟的 白血病性原始淋巴细胞向T细胞、B细胞分化过程中，未 成熟的淋巴系统的细胞标志酶。此外，在鼻咽癌、喉癌 等被认为是病毒感染的肿瘤细胞中，以及与EB病毒有关 的传染性单核细胞增多症、Burkitt淋巴瘤等，均可检出 此酶。
【临床评价】 趋化性是粒细胞到达炎症局部所必需的。本试验是观 察粒细胞向感染灶运动能力的一项重要检测方法。趋化 功能异常可见于Wiskot-Aldrich综合征、幼年型牙周炎、 糖尿病、烧伤、新生儿、慢性皮肤粘膜白色念珠菌病、 高IgE综合征、先天性鱼鳞病、膜糖蛋白（相对分子质量 11000）缺陷症、肌动蛋白功能不全症、Chediak-Hisashi 综合征。
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第四节
【临床评价】 1．急性淋巴细胞白血病（B-ALL除外）可检出较高的 TdT活性，慢性粒细胞性白血病急性变时，约有1／3的病 例在原始细胞中能检出高活性的TdT。 2．恶性淋巴瘤中，原始淋巴细胞性淋巴瘤的淋巴结细 胞中能检出高的TdT活性。 3．此酶检查在研究造血细胞的分化与白血病的关系、 白血病细胞的起源、白血病的治疗药物选择上都有较重要 的价值。
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【临床评价】 l . 血清溶菌酶含量增高 可见于部分急性髓细胞白血 病。①急性单核细胞白血病 ②急性粒-单核细胞白血病 ③急性粒细胞白血病 2．血清溶菌酶含量减低 急性淋巴细胞白血病多数减 低，少数正常。慢性粒细胞白血病血清溶菌酶含量正常， 但急变时下降。
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【原理】 以3H或14C标记的脱氧核苷三磷酸等的dXTP为 基质，用低聚脱氧核苷（dA）等人工同聚物作为引物， 由于酶反应与引物重合，使基质不溶于三氯醋酸，可用 玻璃纤维盘将其吸附，从未被放射性核素标记的反应基 质中分离出反应的生成物，计测放射活性。除去不加引 物所测定的内源性反应所引起的活性之后，可测算酶的 活性。 【参考值】 正常人骨髓细胞的活性为dGTP掺入l〓108个 细胞的量为（0－0.09）mmol／L。
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T细胞白血病的血象
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【 原 理 】 血 细 胞 中 的 酸 性 α- 醋 酸 酯 酶 （ANAE），在弱酸性（pH5.8）条件下能将 基质液中的 α-醋酸萘酯水解，产生 α-萘酚。 产生的 α-萘酯酚再与六偶氮副品红偶联形成不 溶性暗红色偶氮副品红萘酚沉淀，定位于胞质 内酶活性处，呈现单一的或散在的红色点块状 或颗粒状。
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酸性磷酸酶染色
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【临床评价】 l.有助于区分T细胞和B细胞ANAE染色在T细 胞胞质中呈现点状颗粒或大块局限阳性反应中细 胞大多数为阴性反应，偶见稀疏弥散细小颗粒。 2.鉴别急性白血病类型 急性T细胞白血病细胞 为点状或块状阳性，局限分布；急性粒细胞白血 病细胞ANAE染色大部分呈阴性或弱阳性反应， 颗粒增多的早幼粒白血病细胞阳性反应较强，为 弥散性分布；急单呈强阳性反应，胞质为均匀一 致的弥散样淡红色或深红色，无点状颗粒。
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【原理】用P-硝基酚磷酸盐作为细胞碱性磷酸酶总活 性检测的基质，在反应中生成P-硝基酚，测量400nm时的 吸光密度，借以检测出细胞A-Pase的总活性。此外，可 通过CASP作为基质来测定N-碱性磷酸酶的活性。通过酶 反应，生成半胱胺，这是用二硝基苯臵换5-硫-硝基酚酸； 检测412nm的吸光密度，借以检测N-APase的总活性。在 基质液中加人用N-丁醇：水（1：3）的混合液提取粗酶 液，室温下放臵60分钟，记录酶反应，求出酶反应的速 度。一般情况下，N-APase的P-NPP与CASP的水解速度 之比（VP-NPP／VCASP）在1.1－2. 0的范围内，平均为 1．8。因此，N-APase的活性可用 VP-NPP-1.8VCASP求 出，再从VP-NPP计算 N-APase的百分率。
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M5骨髓象的墨汁吞噬试验
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二、白细胞吞噬功能试验 【原理】 分离白细胞悬液，将待测的吞噬细胞与某种可被吞噬 而又易于查见计数的颗粒物质如葡萄球菌混合，温育一 定时间后，细菌可被中性粒细胞吞噬，可在镜下观察中 性粒细胞吞噬细菌的情况，根据吞噬率和吞噬指数即可 反映吞噬细胞的吞噬功能。
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五、白细胞趋化性试验
【原理】 在微孔滤膜的一侧放入粒细胞，另一侧放入趋化因子 （细菌毒素、补体 C3a、淋巴因子等），检测离体粒细 胞潜过滤膜到达趋化因子这一侧定向移动的能力。 【参考值】 趋化指数 3 .0－3. 5
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第二节 白细胞代谢及其产物检验
一、末端脱氧核苷酰转移酶检测 （一）酶标免疫细胞化学显示法 （二）同位素检测法 二、N-碱性磷酸酶检测 三、酸性α-醋酸酯酶检测
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【原理】 末端脱氧核苷酰转移酶（TdT）是一种DNA聚 合酶，它不需要模板的指导，就可以催化细胞的脱氧核 苷酸，使其转移到低聚核苷酸或多聚核苷酸的3’-OH端， 合成单链DNA。兔抗牛TdT抗体能和人细胞的TdT产生交 叉反应，可采用免疫荧光技术或酶标免疫细胞化学技术， 用辣根过氧化物酶-抗酶复合物在细胞涂片上定位，显示 细胞内的TdT。 【结果】 阳性反应为棕黄色颗粒，定位在细胞核上。 TdT为早期 T淋巴细胞的标志，在正常情况下不成熟的胸 腺淋巴细胞出现阳性反应，正常人外周血细胞中极少或 无活性。
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【临床评价】 粒细胞的吞噬功能仅限于成熟阶段，单核细胞幼稚型和 成熟型都具有吞噬能力。急性单核细胞白血病M5a为弱阳 性，M5b吞噬指数明显增高。急性粒细胞白血病（M2 ）、 急性淋巴细胞白血病和急性早幼粒细胞白血病的原始及幼 稚细胞多无吞噬能力，吞噬试验为阴性。急性粒-单核细 胞白血病呈阳性反应，对鉴别有一定价值。慢性粒细胞白 血病的成熟中性粒细胞吞噬能力明显减低。
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四、硝基四氮唑蓝还原试验 【原理】 硝基四氮唑蓝（NBT）是一种染料，其水溶 性呈淡黄色。当被吞入或掺入中性白细胞后，有产生过 氧化物酶的作用，可接受葡萄糖中间代谢产物葡萄糖-6磷酸在已糖磷酸旁路代谢中NADPH氧化脱下的氢，而被 还原成非水溶性的蓝黑色甲颗粒，呈点状或片状沉着在 胞浆内有酶活性的部位，可在显微镜下观察并计数阳性 细胞百分比。 【参考值】 正常成人的阳性细胞数在10％以下。若有 10％以上中性粒细胞能还原NBT，即为NBT还原试验阳 性；低于10％则为阴性。
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【临床评价】 1.用于中性粒细胞吞噬杀菌功能异常的过筛鉴别和辅助 诊断儿童慢性肉芽肿，葡萄糖-6-磷酸脱氢酶缺乏症，髓 过氧化物酶缺乏症和 Job综合征，NBT还原试验阳性。 2.用于细菌感染的鉴别 3.器官移植后发热的鉴别 4.无丙种球蛋白血症、镰状细胞病、恶性营养不良等 NBT还原阳性细胞比例可降低。 5．新生儿、小儿成骨不全症、心肌梗死急性期、淋巴 肉瘤、NBT还原阳性细胞比例可增高。
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第三节 白细胞动力学检验
一、氚标记脱氧胸苷测定 二、泼尼松刺激试验 三、肾上腺素激发试验 四、二异丙酯氟磷酸盐标记测定 五、流式细胞仪检测DNA合成及含量 六、粒细胞抗体检测
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【参考值】 吞噬百分率（62.77〒1.38）％ 吞噬指数1.058〒0.049 【临床评价】 l.吞噬细胞吞噬功能低下主要见于各种恶性肿瘤，吞噬 率常低于45％，手术切除好转后可以上升，故可作为肿 瘤病人化疗、放疗、免疫治疗疗效的参考指标。 2.一些免疫功能低下的病人，吞噬率降低，可作为预测 感染发生的概率。并观测疗效、判断预后的指标。
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第十章 白细胞检验的基本方法
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第一节 白细胞功能检验
一、墨汁吞噬试验 二、白细胞吞噬功能试验 三、血清溶菌酶活性试验 四、硝基四氮唑蓝还原试验 五、白细胞趋化性试验 六、吞噬细胞吞噬功能试验
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一、墨汁吞噬试验 【原理】 血液中中性粒细胞及单核细胞对细菌、异物 等具有吞噬作用。在一定量的肝素抗凝血中，加人一定 量的墨汁，经37℃温育4小时，涂片染色镜下观察吞噬 细胞对墨汁的吞噬情况，并计算吞噬率及吞噬指数。 【参考值】 成熟中性粒细胞吞噬率74％〒15％，吞噬 指数 126〒60；成熟单核细胞吞噬率95％〒15％，吞噬 指数313 〒86。