图 1 标准色谱图
表 1 洗脱梯度表
时间 流量 ( m l /m in) 流动相 A ( % ) 流动相 B (% ) 曲线
0
11 0
97
3
3
11 0
97
3
6
12
11 0
50
50
6
19
11 0
50
50
6
20
11 0
25
75
6
26
11 0
25
75
6
27
11 0
97
3
6
212 样品提取液的选择与优化 11种组 分中, 甜味 剂易溶于 水, 较难溶 于有机 溶剂; 脂溶
组分标准的峰面积对各组分 浓度做 标准曲 线。保留时 间及扫 描光谱图定性, 外标法定量。
C= c @ 10; C) 样品中待测组分 的含量, m g /kg; c) 待测组 W
分的测定浓度, L g /m ;l W ) 样品重量, g
2 结果与讨论 21 1 HPLC条件的优化
11种组分的极性 差异很 大, 为了 使各 组分能 够很 好的分 离, 我们分别对流动相的 pH、盐浓度以及洗脱梯度等条件进行 了优化。
性抗氧化剂较易溶于有机溶剂, 较 难溶于水; 防 腐剂既 可溶于 水, 又可溶于 有机溶剂。由于各种 组分的化 学性质 差异很 大, 用一种提取液将 11种组 分同时 提取难 以做到。因 此, 我们对 样品加标, 分别对水、各种比例的 甲醇水 溶液以 及纯甲 醇的提 取效率进行了实 验, 结果表 明: 甜味 剂用 50% 甲醇 水溶 液提 取, 效率最高; 而脂 溶性抗 氧化 剂和 防腐 剂 的提 取效 率, 随着 提取液中甲醇比例 的增 加而 提高, 当 使用 纯甲 醇时 提取 效率 最高, 达到 86% ~ 104% (见 表 2)。因 此, 本方 法确 定了 样品 分两步提取: 第一步用甲醇提取抗 氧化剂和 防腐剂; 第 二步用 50% 甲醇水溶液提取甜味剂; 之后将提 取液混合, 上机 同时测 定各组分。
目前测定抗氧 化剂、甜 味剂 和防 腐剂 的方 法主 要有 薄层 色谱法 [ 1] 、比色法 [ 2] 、气相 色谱 [ 3] 和 液相 色谱法 [ 4] , 而 同时测 定抗氧化剂、甜味 剂和防 腐剂 的方 法鲜 有 报道。为 此我 们对 月饼中常见的 7种抗氧化剂: 丁基化 羟基茴香 醚 ( BHA )、丁基 化羟基甲苯 ( BHT )、没食子酸丙酯 ( PG )、没食子酸辛 酯 ( OG )、 没食子酸月桂醇 ( LG )、叔 丁基对苯二 酚 ( T BHQ )、去甲 二氢愈 创木酸 ( NDGA ) ; 2种甜味 剂: 安赛蜜、糖 精钠; 2种 防腐剂: 苯 甲酸、山梨酸这 11种化合物的同时测定技术进行了研究。
标准系列 的配 制: 配 制 安塞 蜜、糖 精 钠 质量 浓 度 分别 为 015、21 5、510、101 0、2510 m g /L, 苯甲 酸、山梨 酸、丁基 化 羟基 茴香醚 ( BHA )、丁基化羟基甲苯 ( BHT )、没食 子酸丙酯 ( PG ) 、 没食子酸辛酯 ( OG ) 、没食 子酸月 桂醇 ( LG )、叔 丁基对 苯二酚 ( T BHQ )、去甲二氢愈创木酸 ( NDGA ) 的质量浓度 分别为 11 0、 510、1010、2510、5010 mg /L 的标准系列。 112 液相色谱条件
[ 作者简介 ] 赵榕 ( 1969 - ), 女, 主管技师, 主要 从事食品污染物 研究工作。
此溶液质量浓度为 11 0 g /L。 抗氧化剂标准储备 液的配 制: 分别 准确称 取 01 0100 g 丁
基化羟基茴香醚 ( BHA )、丁基化羟基甲苯 ( BHT ) 、没食 子酸丙 酯 ( PG ) 、没食子酸辛酯 ( OG ) 、没食子酸 月桂 醇 ( LG )、叔 丁基 对苯二 酚 ( TBHQ )、去 甲 二 氢 愈 创 木 酸 ( NDGA ) 标 准 品 于 10 m l棕色容量瓶中, 用甲醇溶 解并定容。此溶 液质量 浓度为 110 g /L。
甜味剂
安塞蜜 糖精钠 苯甲酸 山梨酸
PG NDGA TBHQ BHA
OG LG BHT
表 2 各种提取液的回收率 (% )
甲醇 B水
0B100
20B80
50B50
80B20
15
64
79
74
0
0
79
20
0
0
74
67
0
0
30
39
0
0
19
27
33
27
11
68
17
191 4
53
85
161 4
191 7
58
90
LG, 没食子酸月桂醇; BHT, 丁基化羟基甲苯。
213 方法的回收率、精密度、检出限和线性范围 在最佳色谱分离条件下, 测定了 各组分 的线性 范围; 对样
品进行了两个浓度 水平 的加 标实验 后, 计 算出 了方 法的 回收 率和方法精密度; 根据 信噪 比推 算出 各组 分的 定性 检出 限和 定量检出限, 结果见表 3。
(北京市疾病预防控制中心, 北京 100013)
[ 摘要 ] 目的: 建立同时测定抗氧化剂、防腐剂和甜 味剂的反相 液相色谱方 法。方法: 以 50 mmo l/L 磷 酸二氢钾 溶液作
为流动相, 采用 梯 度洗 脱。结 果: 可在 30 m in 内 将 11 种 组 分完 全 分 离 并且 测 定。方 法 的 线 性 范 围: 甜 味 剂 015 ~
0
0
36
83
0
0
8
72
0
0
0
44
100B0 39 16 93 86 99 102 101 104 104 109 92
图 2 样品加标色谱图 ASM, 安赛蜜; TJN, 糖精钠; BJS, 苯甲酸; SLS, 山梨酸;
PG, 没食子酸丙酯; NDGA, 去甲二氢愈创木酸; TBHQ, 叔丁基对苯二酚; BHA, 丁基化羟基茴香醚; OG, 没食子酸辛酯;
定月饼中 11种化合物的反相液相色谱法。
[ 关键词 ] 月饼; 抗氧化剂; 防腐剂; 甜味剂; 反相液相色谱
[ 中图分类号 ] R 15515
[文献 标识码 ] A
[文章编号 ] 1004- 8685( 2005) 06- 0693- 03
月饼是中国人喜爱 的传统 食品, 多 集中在 高温、高湿的 夏 末秋初时节生产上市, 易霉变、酸败。为了保证月饼的质量和风 味, 延长月饼的货架期, 在月饼加工过程中经 常加入抗氧化剂、 甜味剂和防腐剂, 而这些化合物对人体有一定的危害, 因此对月 饼中常用的抗氧化剂、防腐剂和甜味剂的监测十分必要。
150 L g /m l( r= 01 9997~ 01 9999); 防腐 剂和抗 氧化剂 11 0~ 300 L g /m l( r = 01 9996~ 01 9999), 回收 率: 7810% ~ 1061 7% ,
相对标准偏差为 21 2% ~ 1217% , 定性检出限: 01 04~ 0118 m g /kg, 定 量检出 限: 01 13~ 01 60 mg /kg。结 论: 建立了同 时测
混合标准液的配制: 分别吸取安 塞蜜、糖精 钠标准 储备液 各 0125 m ,l 苯甲酸、山梨 酸、丁基化 羟基 茴香醚 ( BHA ) 、丁基 化羟 基 甲 苯 ( BHA )、没 食 子 酸 丙 酯 ( PG )、没 食 子 酸 辛 酯 ( OG ) 、没食子酸月桂醇 ( LG )、叔丁基对 苯二酚 ( TBHQ )、去甲 二氢愈创木酸 ( N DGA )的标准储备液各 01 5 m ,l 置于 10 m l棕 色容量瓶中, 用 50% ( v /v ) 的 甲醇 水溶液 定容 至体积 。此溶 液安塞蜜、糖精钠的质量 浓度为 25 m g /L, 苯甲酸、山 梨酸、丁 基化羟基茴香醚 ( BHA )、丁基化羟基甲苯 ( BHT ) 、没食 子酸丙 酯 ( PG ) 、没食子酸辛酯 ( OG ) 、没食子酸 月桂 醇 ( LG )、叔 丁基 对苯二酚 ( T BHQ )、去甲二氢愈创 木酸 ( NDGA ) 的质量 浓度为 50 m g /L。
1 材料与方法 11 1 仪器与试 剂 11 111 仪器 W aters- 2695 高效液相 色谱仪, 配 备有 W aters - A lla ins2695泵控系 统, 以及 W ate rs- 2996 二极 管 阵列 检测 器。 11 11 2 试剂 甲醇, 色谱纯 (迪 马公司 ); 乙腈, 色谱纯 (迪马 公司 ) ; 磷酸二氢钾, 分 析纯; 苯 甲酸、山 梨酸、糖 精钠、丁 基化 羟基甲苯、没食子酸 丙酯、丁 基化 羟基 茴香 醚、去甲 二氢 愈创 木酸和安赛蜜的标准 品购自 F luka公司; 叔丁基对 苯二酚标准 品购自 Chem Serv ice公司; 没食 子酸 月桂 醇标准 品购 自 A c ros O rganics公司; 没食子酸辛酯标准 品购自 A ldrich 公司; 试验用 水均为超纯水; 高纯氮。
中国卫生检验杂志 2005年 6 月 第 15卷 第 6期 C h inese Jou rnal of H ea lth Laboratory Technology, Jun 2005; V ol 15 N o 6
在 11种组分中, 苯 甲酸和山梨酸受 pH 值的影响 较大, 其 保留时间随着流动相 pH 值的加大而增加, 而其他 组分的保留 时间受 pH 值的影 响较小。 当流动 相的 pH = 5时, 11种 组分 能够很好分离。
我们分别对 pH = 5的乙酸钠 - 乙酸 和磷酸二 氢钾两种体 系进行了选 择。由于乙 酸钠 - 乙 酸在测 定波 长 230 nm 有吸 收, 梯度洗脱时会造 成基 线漂 移, 因此, 我 们确 定了 磷酸 二氢 钾水溶液为流动相 A 液。