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网织红细胞检测完整版.ppt
活体染色图
常用仪器检测
ADVIA120仪器 对Retc可提供6个参数,包括网织红细胞总数 (Retic#)、网织红细胞百分比(Retic%)、网 织红细胞平均体积(MCVr)、单个网织红细胞平 均血红蛋白浓度(CHCMr)、网织红细胞分布宽 度(RDWr)、单个网织红细胞血红蛋白含量 (CHr)等 其中意义最大的除了总数,百分比以外,最重要 的网织红细胞血红蛋白含量(CHr)参数。最大 的优点之一是随时可计数Retic,十分便利,而且计 数的细胞多,故很准确。
利用上述三个指标可计算网织红细胞的成熟指数 (reticulocyte materation index,RMI)。RMI对评价骨 髓移植后造血功能恢复情况和EPO的疗效,以及监护 放、化疗对骨髓的抑制作用具有更高的敏感性。
检测图示
网织红细胞平面散射图
方法学评价
手工镜检法的优点是便捷、成本低。目前仍 为临床实验室的常规检验方法。但致命的缺 点是影响因素多、重复性差,CV≥20%,以 低Reti的标本尤为明显。 即使进行绝对值计算,也因Reti计数不准确、 某些贫血网织红细胞提前释放而失去其可靠 性。这些不足严重影响了该指标的临床应用。 须加强质量控制,必要时对计数结果加以校 正。大Βιβλιοθήκη 胞贫血网织红细胞降低
增高
叶酸、 VitB12缺乏
未经治疗的 叶酸、 VitB12缺乏
叶酸或VitB12缺乏 的急性失血
网织红细胞反应
缺铁性贫血或巨幼细胞贫血分别给予铁 剂、维生素B12或叶酸治疗2-3d后,网织 红细胞计数值开始上升,7-10d达到最高 (10%左右);两周以后逐渐降至正常水平, 红细胞、血红蛋白开始升高。该过程表 示贫血得到纠正。若网织红细胞居高不 下,提示尚未达到治疗效果。
网织红细胞增高
提示骨髓造血功能旺盛 见于各种增生性 贫血如缺铁性贫血、巨幼细胞性 (缺乏叶 酸、维生素B12) 贫血、失血性贫血,尤以 溶血性贫血时增加最为显著,常>10%。
缺铁性贫血及巨幼细胞性贫血在给予铁剂、 维生素B12、叶酸治疗之后,可见网织红细 胞明显增加。
小细胞贫血
缺铁性贫血
单个网红内血红蛋白含量(CHr),小红 细胞比率(%Micro)/低色素红细胞比率 (%Hyp)即M/H对缺铁性贫血是很好的 指标。
重要分析参数
网织红细胞血红蛋白含量(CHr) BAYER ADVIA120 血液分析特有的测定 参数之一,目前被认为具有诊断和疗效 观察价值的新的网织红测定参数。 CHr已经被FDA认可作为临床报告参数, 正常人CHr> 28.0 pg/L
网织红细胞成熟指数
网织红细胞成熟指数(RMI) 计算参数 计算公式: RMI=(MFR+HFR)/ LFR × 100% ※ RMI对评价骨髓移植后造血功能恢复情 况和EPO的疗效,以及监护放、化疗对 骨髓的抑制作用具有更高的敏感性。
检测仪器
根据网织红细胞发射 荧光强弱来判别区分 网织红细胞成熟程度, 不同成熟阶段的网织 红细胞含有不同量的 RNA,从而根据荧光 强度而获得低、中、 高荧光强度网织红细 胞群。
LM H
检测技术
流式细胞术(flow cytometry)
原理 RNA经碱性荧光染料处理后,根据荧光强度反 映细胞内RNA含量,可将Reti分为高荧光强度网织红 细胞(HFR)、中等荧光强度网织红细胞(MFR)和 低荧光强度网织红细胞(LFR)三部分。
晚幼 红细
胞
中幼 红细
胞
原始 红细
胞
早幼 红细
胞
各种网织红细胞
网织红细胞检测技术
网织红细胞计数方法
活体染色手工镜检 血液自动分析仪法 流式细胞术检测法
手工镜检法
原理 活体染料的碱性着色基团(带正电 荷)可与网织红细胞RNA的磷酸基(带负 电荷)结合,使RNA胶体间的负电荷减少 而发生凝缩,形成有色的点状、线状甚至 连缀成网状结构,而血红蛋白着色相对较淡。 借此在光镜下与成熟红细胞相区别。
方法学评价
自动化仪器在许多方面具有标准化程序,试 剂稳定、反应时间一致,计数细胞量大、具 有质控和校准能力,因此在精密度和准确度 上明显优于显微镜计数法。 但仪器价格比较偏高,试剂成本和质控成本 大,影响到基层医院、小型实验室的使用期 望及推广。
临床应用部分
临床参考范围
目前临床上网织红细胞的参考范围为 成人:0.8%~2.0% , 绝对值(25~75)
缺铁性贫血
正细胞贫血
网织红细胞
增高
正常或减低
急性出血 溶血综合征 骨髓衰减 慢性贫血
网织红细胞减低
提示骨髓造血功能低下, 常见于 再生障碍性贫血。 绝对值低于 5×109/L可做为急性再生障碍性 贫血的辅助诊断指标。此外,还 可见于骨髓浸润性贫血如急性白 血病等。
图1 再障性贫血
图2 骨髓浸润性贫血
* 109/L 新生儿:2.0%~6.0% 网红的总数或百分比对贫血的临床诊断 及疗效观察非常有价值,是血液最常做 的项目之一。
临床意义
网织红细胞不仅仅是个计数参数问题,更有许 多新的参数被引入临床应用、科研和基础研究。 网织红细胞的增加或减少直接反映了骨髓红细 胞的生成能力,主要用于对红细胞减少性疾病、 溶血性贫血、治疗监测或骨髓移植后骨髓造血 功能的恢复、监测放疗和化疗对骨髓造血功能 的影响评估等方面。
操作方法
①取干净试管一只,加入10g/L煌焦油蓝溶液2~3滴,然后加入等 量的血液混匀后放置15~20min,使红细胞充分染色;
②取少许染色好的血液,在洁净载玻片上推成薄而均匀的血膜, 干燥后用瑞氏染液复染(也可不复染);
③在显微镜低倍镜下选择细胞分布均匀着色清晰的部位,用油镜 在血片上计数至少1000个红细胞分布区域内的网织红细胞再除 以1000计算出网织红细胞的百分率。同时进行红细胞计数,可 计算网织红细胞的绝对值。
网织红细胞检测技术 及临床应用
任燕歌
概念
网织红细胞(reticulocyte,Ret或Reti) 界于晚幼红细胞和成熟红细胞之间的过 渡阶段细胞。因其胞质中残存的核糖核 酸经碱性染料活体染色后,呈现点状或 线网状结构,故名网织红细胞。
成熟 红细
胞
网织 红细
胞
多能 干细 胞
单能 干细
胞
红细胞发育过程图