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网织红细胞检测完整版.ppt


活体染色图
常用仪器检测
ADVIA120仪器 对Retc可提供6个参数,包括网织红细胞总数 (Retic#)、网织红细胞百分比(Retic%)、网 织红细胞平均体积(MCVr)、单个网织红细胞平 均血红蛋白浓度(CHCMr)、网织红细胞分布宽 度(RDWr)、单个网织红细胞血红蛋白含量 (CHr)等 其中意义最大的除了总数,百分比以外,最重要 的网织红细胞血红蛋白含量(CHr)参数。最大 的优点之一是随时可计数Retic,十分便利,而且计 数的细胞多,故很准确。
利用上述三个指标可计算网织红细胞的成熟指数 (reticulocyte materation index,RMI)。RMI对评价骨 髓移植后造血功能恢复情况和EPO的疗效,以及监护 放、化疗对骨髓的抑制作用具有更高的敏感性。
检测图示
网织红细胞平面散射图
方法学评价
手工镜检法的优点是便捷、成本低。目前仍 为临床实验室的常规检验方法。但致命的缺 点是影响因素多、重复性差,CV≥20%,以 低Reti的标本尤为明显。 即使进行绝对值计算,也因Reti计数不准确、 某些贫血网织红细胞提前释放而失去其可靠 性。这些不足严重影响了该指标的临床应用。 须加强质量控制,必要时对计数结果加以校 正。大Βιβλιοθήκη 胞贫血网织红细胞降低
增高
叶酸、 VitB12缺乏
未经治疗的 叶酸、 VitB12缺乏
叶酸或VitB12缺乏 的急性失血
网织红细胞反应
缺铁性贫血或巨幼细胞贫血分别给予铁 剂、维生素B12或叶酸治疗2-3d后,网织 红细胞计数值开始上升,7-10d达到最高 (10%左右);两周以后逐渐降至正常水平, 红细胞、血红蛋白开始升高。该过程表 示贫血得到纠正。若网织红细胞居高不 下,提示尚未达到治疗效果。
网织红细胞增高
提示骨髓造血功能旺盛 见于各种增生性 贫血如缺铁性贫血、巨幼细胞性 (缺乏叶 酸、维生素B12) 贫血、失血性贫血,尤以 溶血性贫血时增加最为显著,常>10%。
缺铁性贫血及巨幼细胞性贫血在给予铁剂、 维生素B12、叶酸治疗之后,可见网织红细 胞明显增加。
小细胞贫血
缺铁性贫血
单个网红内血红蛋白含量(CHr),小红 细胞比率(%Micro)/低色素红细胞比率 (%Hyp)即M/H对缺铁性贫血是很好的 指标。
重要分析参数
网织红细胞血红蛋白含量(CHr) BAYER ADVIA120 血液分析特有的测定 参数之一,目前被认为具有诊断和疗效 观察价值的新的网织红测定参数。 CHr已经被FDA认可作为临床报告参数, 正常人CHr> 28.0 pg/L
网织红细胞成熟指数
网织红细胞成熟指数(RMI) 计算参数 计算公式: RMI=(MFR+HFR)/ LFR × 100% ※ RMI对评价骨髓移植后造血功能恢复情 况和EPO的疗效,以及监护放、化疗对 骨髓的抑制作用具有更高的敏感性。
检测仪器
根据网织红细胞发射 荧光强弱来判别区分 网织红细胞成熟程度, 不同成熟阶段的网织 红细胞含有不同量的 RNA,从而根据荧光 强度而获得低、中、 高荧光强度网织红细 胞群。
LM H
检测技术
流式细胞术(flow cytometry)
原理 RNA经碱性荧光染料处理后,根据荧光强度反 映细胞内RNA含量,可将Reti分为高荧光强度网织红 细胞(HFR)、中等荧光强度网织红细胞(MFR)和 低荧光强度网织红细胞(LFR)三部分。
晚幼 红细

中幼 红细

原始 红细

早幼 红细

各种网织红细胞
网织红细胞检测技术
网织红细胞计数方法
活体染色手工镜检 血液自动分析仪法 流式细胞术检测法
手工镜检法
原理 活体染料的碱性着色基团(带正电 荷)可与网织红细胞RNA的磷酸基(带负 电荷)结合,使RNA胶体间的负电荷减少 而发生凝缩,形成有色的点状、线状甚至 连缀成网状结构,而血红蛋白着色相对较淡。 借此在光镜下与成熟红细胞相区别。
方法学评价
自动化仪器在许多方面具有标准化程序,试 剂稳定、反应时间一致,计数细胞量大、具 有质控和校准能力,因此在精密度和准确度 上明显优于显微镜计数法。 但仪器价格比较偏高,试剂成本和质控成本 大,影响到基层医院、小型实验室的使用期 望及推广。
临床应用部分
临床参考范围
目前临床上网织红细胞的参考范围为 成人:0.8%~2.0% , 绝对值(25~75)
缺铁性贫血
正细胞贫血
网织红细胞
增高
正常或减低
急性出血 溶血综合征 骨髓衰减 慢性贫血
网织红细胞减低
提示骨髓造血功能低下, 常见于 再生障碍性贫血。 绝对值低于 5×109/L可做为急性再生障碍性 贫血的辅助诊断指标。此外,还 可见于骨髓浸润性贫血如急性白 血病等。
图1 再障性贫血
图2 骨髓浸润性贫血
* 109/L 新生儿:2.0%~6.0% 网红的总数或百分比对贫血的临床诊断 及疗效观察非常有价值,是血液最常做 的项目之一。
临床意义
网织红细胞不仅仅是个计数参数问题,更有许 多新的参数被引入临床应用、科研和基础研究。 网织红细胞的增加或减少直接反映了骨髓红细 胞的生成能力,主要用于对红细胞减少性疾病、 溶血性贫血、治疗监测或骨髓移植后骨髓造血 功能的恢复、监测放疗和化疗对骨髓造血功能 的影响评估等方面。
操作方法
①取干净试管一只,加入10g/L煌焦油蓝溶液2~3滴,然后加入等 量的血液混匀后放置15~20min,使红细胞充分染色;
②取少许染色好的血液,在洁净载玻片上推成薄而均匀的血膜, 干燥后用瑞氏染液复染(也可不复染);
③在显微镜低倍镜下选择细胞分布均匀着色清晰的部位,用油镜 在血片上计数至少1000个红细胞分布区域内的网织红细胞再除 以1000计算出网织红细胞的百分率。同时进行红细胞计数,可 计算网织红细胞的绝对值。
网织红细胞检测技术 及临床应用
任燕歌
概念
网织红细胞(reticulocyte,Ret或Reti) 界于晚幼红细胞和成熟红细胞之间的过 渡阶段细胞。因其胞质中残存的核糖核 酸经碱性染料活体染色后,呈现点状或 线网状结构,故名网织红细胞。
成熟 红细

网织 红细

多能 干细 胞
单能 干细

红细胞发育过程图
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