尿常规结果 尿培养结果 可能原因
WBC － PRO －
WBC >+ PRO >+ WBC >+ PRO >+ WBC >+ PRO >+ WBC <++*/－ PRO －
计数 < 105
计数 < 105
无泌尿系统感染
重复送检，检查取样和保存条件 是否符合要求，通知实验室为重 复检查。 预示患者泌尿系统感染。按药敏 结果选择性用药。 患者泌尿系统可能感染，但标本 可能被污染，应重复送检。 标本污染
你看见多少种形态？
呼吸道标本中未被染色的，有折射的杆菌=抗酸杆菌
呈链排列的革兰阳性球菌？或革兰阳性分枝杆菌？
肺中的结节吸出物，不规则“球菌”，分叉，无短链，链的末端的呈尖状，都 证明是分枝状的革兰阳性杆菌，可能是放线菌或诺卡菌（通常来自脑或肺组织 的标本）
呼吸道标本的涂片评估模式
肺炎-可接受的 很少的鳞状上皮细胞 <10个每低倍视野 很多的中性粒细胞 不合格标本 许多鳞状上皮 >10个/低倍视野 很少有或没有中性粒细胞 免疫抑制的病人也会出现 中性粒细胞减少 评述 可以在玻片上看到许多鳞状上皮细胞，说明在 采集时受到了上呼吸道分泌物的污染或口水的 污染。 中性粒细胞和上皮细胞都很少的标本需要培养
微生物鉴定（2）
• 奈瑟菌属、莫拉菌属 • 不动杆菌属 • 布氏杆菌属、巴斯德菌属 • 芽胞杆菌属 • 产单核李斯特菌 • 酵母菌属
药敏试验
• 纸片扩散法药敏试验 • 特殊药敏试验
MRSA 克林霉素耐药的葡萄球菌 VISA或VRSA 青霉素耐药的葡萄球菌 超广谱β-内酰胺酶
早发B群链球菌病
1%的新生儿因母亲定植 （10-30%的孕妇）发展为 EOD 50%病死率 25%的美国女性在L&D期间 得到IV预防 长期病症包括：在30%以上的 新生儿中产生严重精神运动 发展障碍
Adriaanse et al. Neonatal early onset group B streptococcal infection: a nine-year retrospective study in a tertiary care hospital. J Perinat Med. 1996;24:531–538
下呼吸道标本
Lower Respiratory Tract Specimens
下呼吸道感染
Lower Respiratory Tract Infections

急性支气管炎
社区获得性肺炎 院内获得性肺炎 免疫妥协患者肺炎
下呼吸道标本
Lower Respiratory Tract Specimen
纸片扩散法-测量抑菌圈（1）
使用透射光观察 ：
Staphylococcus spp. 葡萄球菌属 linezolid利奈唑烷 oxacillin苯唑西林 vancomycin万古霉素 任何生长均有意义 Enterococcus spp.肠球菌属 vancomycin万古霉素
Light光线
纸片扩散法-测量抑菌圈（2）
细胞内细菌
柱状纤毛上皮细胞
肺泡巨噬细胞
滑石颗粒
见于迁延长时间的呼吸道疾病
淀粉样小体
弹性纤维
库什曼螺旋体
呈链排列的革兰阳性球菌和革兰阴性球杆菌。缺乏鳞状上 皮细胞提示混合厌氧菌感染
几种细菌的混合形态，缺乏鳞状上皮细胞=混合厌氧菌感染。 如果是呼吸道标本可能是吸入性肺炎。报告临床医生“提示 吸入性肺炎”
任何人 任何人 任何人 任何人 不同人
内置导尿管
通过直接导管获得 外科手术从肾脏获得 经皮穿刺膀胱吸取 任意标本 有争议
100,000任意数量机会致病菌
100任意数量机会致病菌 任意数量（肉汤增菌，厌氧菌） 任意数量（肉汤增菌，厌氧菌） 任何数量金黄色葡萄球菌 任何数量的酵母菌
出现如下情况时，怎样判断？
导管尿
是
过夜培养
否
继续培养； 随后观察；发送初步的培养阴性报告
> 104 CFU/ml
< 104 CFU/ml
24小时后仍不生长则发出 最终的生长阴性报告
纯培养的机会致病菌 （查阅凝固酶阴性葡萄球菌的注释）
一种以上细菌生长
检出三种或以上的机会致病菌包括酵母菌 （病人的首份尿标本显示如此的培养结果 ，若重复的尿标本仍然培养出相同的细菌 ，则需要对菌株进行操作）
自然咳痰
诱导痰 气管内吸取物 肺部组织
支气管肺泡灌洗液 保护性毛刷
支气管灌洗液
标本质量
脓痰
粘液样痰
唾液or诱导痰 (?)
带血痰
用革兰氏染色来评估 呼吸道标本是否合格
痰标本>10鳞状上皮细胞/每低倍视野=拒收
有PMN的痰标本，中性粒细胞多，且鳞状上皮细胞特别少 = 接受，进行培养
粘液丝
胞内细菌 ——提示感染
（孕妇，婴儿，全膀胱）
微导管尿（内部导管和外部导管）-老年人
中段尿，清洁留取——急诊成年人
留置导尿管中采集的标本（经常被三种以上细菌污染）
尿液标本
采集中段尿时要先用肥皂清洗女性的外阴和男性的外
生殖器包括包皮内，然后用清水冲洗
长期留置导尿管的患者应在更换新管时留取尿标本。
做厌氧培养时应耻骨上膀胱穿刺采集尿。
细胞内微生物 成块的小的灰白的染色不规则的阳性成链的球菌 很细小的革兰氏阴性杆菌
微生物鉴定
微生物鉴定（1）
• • • • • • • • • •
血平皿上的菌落形态 革兰阳性细菌 所有的链球菌 β-溶血链球菌 α-溶血链球菌与肺炎链球菌 葡萄球菌属 肠道革兰阴性杆菌 沙门菌属，志贺菌属 假单胞菌属 嗜血杆菌属
1.
在孕期35～37周时的普查培养
a. b. c. d. 阴道和直肠拭子 肉汤过夜增菌 接种于血平板上 再孵育过夜和鉴定可疑菌落
2. 3.
任何有GBS菌尿的患者需要在分娩期做好预 防 分娩时快速检测敏感性不够
男性生殖道标本送检
男性的生殖道致病菌与女性绝大部分一致； 尿道炎通常由淋病奈瑟氏菌或非淋病奈瑟氏菌引起； 可能并发于生殖器溃疡；
实验室
直接检测
EQA标本
环节四
培养
环节五
培养基、冰箱 温箱、气体
分 析 中
检测 报告
仪器设备、试剂 环节六
分 析 后
对每个环节进行控制，构成质量保证体系
内 容
标本处理 微生物鉴定
药敏试验
标本处理
• 血培养 • 脑脊液培养 • 呼吸道标本 (痰标本、咽部标本） • 尿培养 • 生殖道标本培养 • 抽吸物和组织标本的培养（需氧、厌氧培养） • 粪便培养
严格无菌操作
soap
脑脊液
CEREBROSPINAL FLUID
无菌操作，腰椎穿刺采样
最少1 mL，最好>5 mL
打入3个小管中，以第二根小管送检培养 分枝杆菌培养标本需要2 mL以上，置于4℃保存 即时送检 绝对不能冷藏！
上呼吸道标本
Upper Respiratory Tract Specimens
使用反射光观察： 所有其他药物/菌株组 合
Light光线
纸片扩散法-测量抑菌圈（3）
变形杆菌属…. 忽略迁徙性生长
纸片扩散法-测量抑菌圈（4）
测量完全抑菌的圈
Linezolid 利奈唑烷
纸片扩散法-测量抑菌圈（5）
大肠埃希菌混杂有肠球菌；用纯培养 重复试验
铜绿假单胞菌耐药亚群 ；测量无 菌区域
评价尿培养的标准
病人 无症状者 有症状者，不固定的 有症状，性活跃女性 男性 标本特征 清洁留取 清洁留取 清洁留取 清洁留取 有意义菌落形成单位/ml（非皮肤污染） 100,000 10,000 1-2种机会致病菌。若多于2种则认为尿 液被污染 100个纯菌落肠杆菌科菌 1000个，机会致病菌
任何人
鉴定&药敏
多种肠道细菌或混杂的皮肤菌丛；重新采集清 洁标本
1-2种机会致病菌（查阅凝固酶阴性葡萄球菌的以上相同注释
多种肠道细菌或混杂的皮肤菌丛； 重新采集清洁标本.
进行鉴定和药敏，若数量< 104CFU/ml， 仍然对可能的致病菌进行操作
若为腐生葡萄球菌， 则处理与其他致病菌相同； 其他的凝固酶阴性葡萄球菌则视为污 染
临床微生物室标本处理及检验流程
Infection Control Team
The Role of the Clinical Bacteriology Lab
临床微生物检验流程示意
分 析 前
门诊 病房 诊所
不合格
留取
临床标本
SOP
环节一 环节二 环节三
+
SOP
运送
合格
IQ
标本合格 判定
标本合格？ 接种
尿液运输方法
如不能及时送检，需冷藏。
4小时延迟送检，须废弃标本。
自然排尿 是 过夜培养 否
继续培养； 随后观察；发送初步的培养阴性报告
> 105 CFU/ml
< 105 CFU/ml
24小时后仍不生长则发出 最终的生长阴性报告
纯培养的机会致病菌 （查阅凝固酶阴性葡萄球菌的注释）
1 organism 一种以上细菌生长
拭子吸附细菌，难于释放到平板培养 尽可能抽吸或将拭子深入伤口，紧贴伤口前沿取样深部 伤口和特殊原因造成的伤口，如动物咬伤，应考虑厌氧培 养；
组织和抽吸物涂片检查
发现 出现鳞状上皮细胞 大量的中性粒细胞 大量的中性粒细胞染色多样染色阳性和阴性，小的细 菌 出现少量破碎的中性粒细胞和比较大的面包车样的染 色不定的杆菌 很少有中性粒细胞，但是有其他体细胞 评述 提示标本采集技术不过关；培养出来的可能是 皮肤正常菌群 如果查见细胞内的细菌，则更有意义。 混合有厌氧或兼性厌氧菌感染 可能是梭菌引起的组织坏死，紧急外科手术， 产气荚膜梭菌引起的气性坏疽 患者不能产生足够的免疫反应或微生物不能趋 化中性粒细胞（如球菌）。仍然高度怀疑细菌 病因。 细菌感染 如果分离自脓肿，提示咽峡炎链球菌（米勒链 球菌）感染。 特别是从淋巴结或组织中分离的，可能是生物 恐怖试剂（布鲁氏杆菌，耶尔森，弗朗西斯） 要在风厨中操作。平板用胶条密封在生物安全 柜中操作，不可以嗅标本。